川崎病小鼠模型心功能演变过程研究

娄萍，焦富勇，张雪梅，张丹，赵颖，赵欣，王俊香，金晶，曹玲

川崎病（Kawasaki disease，KD）又称为小儿皮肤黏膜淋巴结综合征，是一种以全身中小动脉炎症病变为主要特征的急性免疫系统疾病［1］，其病因不明。相关研究表明，KD可能与感染、遗传和超抗原因素有关［2-3］。KD好发于5岁以下儿童，其可导致患儿发生严重心血管病变，以冠状动脉损伤最为严重，包括冠状动脉扩张和冠状动脉瘤形成，最终导致患儿心肌缺血、心肌梗死等，目前其已取代风湿热而成为我国小儿后天性心脏病的主要病因之一［4］。本研究通过干酪乳杆菌细胞壁成分（lactobacillus casei cell wall extract，LCWE）诱导小鼠KD模型，并观察其心功能的演变过程，旨在探讨KD对心功能的影响。

1 材料和方法

1.1 LCWE制备 本实验时间为2020年1月。将干酪乳杆菌（贝纳细胞生物保存管理中心，第134415号）培养于乳酸菌肉汤培养基中24 h，在对数生长期收集细菌，添加4% SDS裂解，4 000 r/min离心30 min（离心半径8 cm），使用磷酸缓冲盐溶液（phosphate buffer saline，PBS）反复冲洗，加入250 μg/ml RNase、DNase和胰蛋白酶，在37 ℃培养箱中培养4 h，使用PBS再次清洗后收集细菌碎片，并取1 g湿重加入5 ml PBS，冰浴，使用超声细胞破碎仪处理2 h（超声5 s、间隙5 s，功率300 W），将处理后的溶液离心1 h（4 ℃，15 600 r/min、离心半径8 cm），配置成LCWE的终液。

1.2 动物制备 随机选择50只BALB/c小鼠〔北京维顿利华实验动物技术有限公司,生产许可证SCXK（北京）2016-0006，销售许可证SYXK（陕西）2012-005〕，体质量（17.0±0.5）g,无特定病原体，将其分成模型组30只和对照组20只，并分别编写序号。模型组小鼠经腹腔注射LCWE的终液，单次注射0.5 ml；对照组小鼠不做任何处理。

1.3 方法 检测对照组及模型组小鼠建模后2 d、15 d、30 d心功能指标，具体如下：将小鼠胸口毛脱掉，放入密封盒中，吸入异氟烷将其麻醉，仰卧位固定在检查台上，同步记录小鼠心率。……