基于四环素诱导型Hnf1β和Foxa3表达载体的小鼠胚胎成纤维细胞转分化为肝干细胞的实验体系研究

虞欣璐，于 兵，#，王 辰，张红霞，朱海英，*

(1．海军军医大学基础医学院细胞生物学教研室，上海 200433；2．解放军960医院检验科，山东 济南 250031)

谱系重编程(lineage reprogramming)是指不经过中间的多能性状态而直接通过转分化将一种成熟的体细胞转变成其他类型的体细胞或者成体干细胞。近年来，利用谱系重编程技术，研究者已经可以将成纤维细胞转分化为心肌细胞、感光细胞，将神经胶质祖细胞转分化为中脑多巴胺能神经元，将人胆囊细胞转分化为产生胰岛素的β样细胞。2014年，海军军医大学细胞生物学教研室胡以平教授团队在小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblast cells，MEF)中过表达肝脏器官发生相关的两个转录因子，肝细胞核因子1β(hepatocyte nuclear factor 1-β，Hnf1β)和叉头框a3(forkhead box A3，Foxa3)，配合适当的诱导培养液，经过15～20 d，可以将其重编程为诱导性肝干细胞iHepSCs(induced hepatic stem cells)。他们的研究证明iHepSCs具有双向分化能力，细胞移植后可修复受损肝组织且不具有成瘤能力，具有潜在的临床应用前景，但该过程所涉及的分子机制还不清楚。例如，重编程过程中的关键基因是如何被激活的，细胞的表观遗传特性又发生了哪些变化，哪些因子的激活和持续表达是重编程的关键因素等问题均需进一步阐明，才能为今后将该技术体系应用于人的成纤维细胞转分化研究提供更多的参考。

有研究表明四环素控制的诱导型表达载体在重编程分子机制研究方面发挥了重要作用。2008年，Brambrink等和Stadtfeld等就利用这个体系揭示了MEF去分化成为诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells，iPSCs)重编程的时间进程，鉴定了每个阶段的关键基因，为研究重编程机制提供了重要的研究资料。……