circCSPP1通过吸附miR-431促进结直肠癌增殖转移

袁晨磊，张 姚，关杰文，窦 唯，张 鹏，赵 鑫

（1.苏州大学医学部，江苏 苏州 215123；2.苏州大学附属第一医院胃肠外科，江苏 苏州 215006）

结直肠癌（colorectal cancer, CRC）是消化系统最常见的恶性肿瘤之一，其发病率呈增长趋势。近年来肠镜检查的普及以及腹腔镜手术的发展，CRC的手术效率、术后临床疗效都有了显著的进步，但CRC的预后却仍不乐观，尤其是晚期转移患者，5年生存率不超过10%[1]。因此，阐明CRC的进展机制，发现新的生物标志物，对CRC的治疗具有重要意义。

微小RNA（micro RNA, miRNA）是一种非编码RNA分子（长度为20～22 个核苷酸），主要功能是通过与靶向mRNA的3'非翻译区（UTR）结合来防止mRNA转录或在转录后水平上引发mRNA降解[2]。鉴于miRNA高度的组织特异性，通过靶向组织中的miRNA对包括CRC在内的恶性肿瘤有巨大的临床应用前景。另外在竞争性内源RNA（ceRNA）的理论中，circRNA竞争性结合miRNA，miRNA可以将circRNA的信号转移至下游mRNA中，抑制mRNA的翻译过程，最终影响基因的表达[3]。

环状RNA（circular RNA, cricRNA）是一种新发现的具有共价闭环结构的长非编码RNA，广泛存在于人体细胞中[4]。circRNA在基因调控中起着至关重要的作用，如作为miRNA海绵吸附miRNA，调控相关基因以及多肽的表达等[4-8]。最新的研究[8-12]表明，circRNA在包括CRC在内的多种恶性肿瘤中发挥了重要的调控作用。circCSPP1作为新近发现的cricRNA在包括神经胶质瘤以及肝细胞癌中的机制已有相关研究，但其作用的分子机制尚不清楚。本研究旨在探讨circCSPP1在CRC中的作用及机制。

1 材料与方法

1.1 材料 PrimeScrip RT reagent Kit和SYBR Green PCR试剂盒购自Takara公司；NanoDrop 2000超微量分光光度计购自美国Thermo公司；Trizol试剂购自Invitrogen公司；链霉素、青霉素与DMEM培养基购自GIBCO公司；……