荔波唇柱苣苔黑斑病病原菌鉴定

朱佳敏 付 莉 吴跃开 张 序

(1.贵州省核桃研究所，贵州 贵阳 550005；2.贵州省林业科学研究院，贵州 贵阳 550005；3.修文县谷堡镇林业站，贵州 修文 550213)

荔波唇柱苣苔(Chiritaliboensis)属苦苣苔科唇柱苣苔属多年生草本植物，为贵州特有，仅产于荔波县境内，其花色彩艳丽，叶形叶色较好，观赏价值很高，可作盆栽花卉、园林绿化植物等[1-2]。作为新开发的花卉品种，目前对其研究方向多集中在扦插繁殖技术等方面[3-4]；随着人工规模化栽培，荔波唇柱苣苔病虫害问题日益突显，其中表现最严重的就是黑斑病。该病主要危害荔波唇柱苣苔的叶片，感病后感病部位会产生黑褐色的病斑，严重时病斑遍布整个叶片，造成叶片焦枯、卷曲，甚至整株枯死。目前，荔波唇柱苣苔黑斑病的病原尚未明了，相关研究还是空白。有鉴于此，本文通过形态学及分子生物学手段对荔波唇柱苣苔黑斑病的致病病原菌进行了鉴定，以期为今后的病害防治工作提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

分离材料：病原分离材料采自贵州省贵阳市惠水县苗圃基地发病的荔波唇柱苣苔植株。

采集时间：2019年6月。

PDA培养基：马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g、蒸馏水1000mL，121℃ 灭菌30min。

试剂-及仪器：PCR扩增试剂盒、DNA提取试剂盒、引物ITS1/ITS4(均购于生工生物工程(上海)股份有限公司)。

1.2 荔波唇柱苣苔黑斑病发病症状观察

在苗圃中对荔波唇柱苣苔感病植株进行详细观察，记录病害危害状况、危害部位、危害症状等；室内在解剖镜下观察病斑上是否存在相关病征(子实体)。……