丹参饮预处理保护缺血/再灌注损伤模型大鼠心肌细胞实验研究

任耀龙，杨 磊，赵明君，郑 刚，徐佳萌，尤金枝，李莹超

(1.陕西中医药大学附属医院，陕西 咸阳 712021；2.陕西中医药大学，陕西 咸阳 712046)

急性心肌梗死是常见的严重威胁人类生命安全的心血管系统急危重症,临床治疗的首要目的在于尽快开通阻塞血管,恢复心肌血流灌注。然而，伴随而来的心肌缺血/再灌注损伤(Myocardial ischemia-reperfusion injury，MIRI)严重制约了临床获益[1]。目前，认为MIRI与氧化应激[2]、细胞内钙超载[3]、生理pH值快速恢复[4]、心肌能量代谢障碍[5]、炎症反应[6]等有关，但其具体病理生理机制尚未明确，且西医学应对手段较为有限。丹参饮由丹参、檀香、砂仁组成，具有活血祛瘀、行气止痛等临床功效，广泛应用于急性心肌梗死的临床治疗，并显示出一定的临床疗效。本研究以丹参饮预处理干预大鼠MIRI模型在体心肌细胞，探索中医经典名方丹参饮对大鼠心肌的保护作用及其可能的作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 研究动物：选择SPF级健康成年SD大鼠50只，雄性25只，雌性25只，质量180～210 g，购于成都达硕实验动物有限公司，许可证号[SCXK(川)2015-030]。实验动物饲养于陕西中医药大学协同创新中心SPF级动物实验中心，给予标准饲料及饮用水喂养7 d后用于实验。

1.1.2 主要试剂与仪器：肌酸激酶同工酶(Creatine kinase-MB，CK-MB)和N-末端脑钠肽前体(N-terminal probrain natriuretic peptide，NT-proBNP)试剂盒(批号20191231)，乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase， LDH)试剂盒(批号20191228)。八通道研究型高速记录系统(澳大利亚埃德公司，型号PL3508/P)、SC-5型小动物呼吸机、全自动酶标仪(美国Bio-Tek公司，型号ELXSOSIU)、高速冷冻离心机(日本日立公司，型号CR22GⅡ)、Leica VT1000 S振动切片机、TC-120S生物组织自动脱水机、TR-180生物组织自动染色、倒置荧光数码显微镜[Nikon公司，型号TS100-F(配DS-5MC)IX73-U]。……