荧光定量PCR 法在乙型肝炎病毒检测中的应用价值

张会娟（周口永善医院检验科，河南 周口 461300）

乙型肝炎病毒（HBV）简称乙肝病毒，因传染性高，对公共卫生造成严重的影响，长期携带HBV 者因失去治疗信心，使病毒在体内反复复制，产生病变［1］。该病严重威胁患者的身体健康，因具有较高的传染性，给患者及家人带来极大的精神负担［2］。因此，及时寻找和诊断乙肝病毒的检测方法对临床具有重大意义，酶联免疫吸附法测定（ELISA）和荧光定量PCR法是临床上常用的两种检测乙肝病毒的方式［3，4］。 本研究为分析这两种方法在乙型肝炎病毒检测中的应用。 报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取 2017 年 6 月～2019 年 6 月我院收治的180 例乙型肝炎病毒携带者，其中男110 例、女 70 例；年龄 20～56（32.15±5.31）岁。

1.2 方法 所有患者均分别使用荧光定量PCR 法和酶联免疫吸附法检测，所有患者及其家属均知情并自愿签署知情同意书。 （1）试剂和仪器：ABI 7500Fast型荧光定量检测仪从美国ABI 公司购买，华泰和合（北京）商贸有限公司提供的CMax Plus 酶标仪和全自动洗板机，从上海浩源生物公司购买HBV DNA 荧光定量PCR 检测试剂盒，从厦门新创公司购买酶联免疫吸附测定试剂盒。 （2）荧光定量PCR 法：无菌条件下采集患者空腹静脉血5ml，在温度为4℃的冰箱中放置2h 后，挑出S/CO≥15 且HBsAg 筛查为有反应性的血浆，以3 500r/min 离心 10 min 分离血清。 采用ABI 7500Fast 型荧光定量检测仪和HBV DNA荧光定量PCR 检测试剂盒检测乙型肝炎病毒的DNA（HBV-DNA）浓度。 经 A450-630nm 计算光度值，吸光度值判定检测结果。 （3）ELISA：使用 CMax Plus 酶标仪、全自动洗板机及酶联免疫吸附测定试剂盒检测乙型肝炎标志物， 包括乙肝表面抗体（HB-sAb）、乙肝表面抗原（HBsAg）、乙肝 e 抗原（HBeAg）、乙肝 e 抗体（HBeAb）及乙肝核心抗体（HBcAb）。……