芪枝渴痹通方对高糖诱导大鼠雪旺细胞RSC96活性氧含量及凋亡的影响

王萌萌，王国强，米 佳，赵芸芸，张泽鹏，李晓敏，王秀阁*

（1.长春中医药大学，长春 130117 ；2.长春中医药大学附属医院，长春 130021；3.长春中医药大学附属第三临床医院，长春 130117）

糖尿病周围神经病变（diabetic peripheral neuropathy，DPN）是一种排除诊断，非糖尿病性神经病可能存在于糖尿病患者中，对于临床实践，糖尿病多发神经病变的简单定义是“排除其他原因后，糖尿病患者会出现症状和/或周围神经功能障碍的体征”[1]。国际糖尿病联盟指出，糖尿病患者在2030年将达到5.78亿人，2045年将上升到7亿人[2]。中医药治疗DPN多靶点，副作用小。根据中药的多靶点特点，我们通过体外实验验证芪枝渴痹通方（QZKBTF）对高糖诱导的大鼠雪旺细胞（RSC96）活性氧（ROS）含量及细胞凋亡的影响。

1 材料与方法

1.1 实验细胞株

大鼠永生化雪旺细胞株（RSC96）购于美国ATCC公司。

1.2 实验药物

芪枝渴痹通方（由黄芪、桑枝、豨莶草、全蝎、威灵仙等组成）购于长春中医药大学附属医院药剂科。

1.3 实验试剂

DMEM培养基（Gibco，批号：2105325），胎牛血清（FBS）（Clark bioscience，批号：JC65116），青霉素（Genview，批号：9111310460），链霉素（Genview，批号：81224010250），碳酸氢钠（北京化工厂有限责任公司，批号：20180531），SDS（BioFroxx；批号：EZ3414B217），盐酸（北京化 工厂有限责任公司，批号：20181214），胰酶（BioFroxx；批号：EZ4567C127），葡萄糖（北京化工厂有限责任公司，批号：20180921），甘露醇（天津市福晨化学试剂厂，批号：20160302），噻唑蓝（MTT）（北京化工厂有限责任公司，批号：TC2014120101），Annexin V-FITC/PI 双染细胞凋亡检测试剂盒（贝博，批号：BB20051），活性氧检测试剂盒（碧云天，批号：011520200402）。

1.4 实验仪器

高级倒置相差显微成像系统（尼康，型号：TS2），多功能酶标仪（TECAN，型号：Infinite M200 PRO），低速离心机（北京雷勃尔医疗器械有限公司，型号：LD5-10B），二氧化碳培养箱（Thermo，型号：371），电热恒温水浴锅（天津市泰斯特仪器有限公司，型号：DK-98-II），MM-1微型振荡器（江苏金坛金城国盛实验仪器厂），CytoFLEX[贝克曼库尔生物科技（苏州）有限公司，型号：A00-1-1102]。……