王涛,陶金,方烨红,崔欢,马超
(中国医学科学院基础医学研究所,北京协和医学院基础学院人体解剖与组织胚胎学系,北京 100005)
慢性背根神经节压迫(chronic compression of dorsal root ganglion,CCD)模型能够最大程度模拟临床腰椎间盘突出患者的症状[1],是研究慢性神经病理性疼痛的动物模型。背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)初级感觉神经元可以将皮肤感受致痒与致痛刺激通过外周轴突、中枢轴突传递给脊髓[2]。CCD可以增加感觉神经元自发放电活动,提高神经元胞体的兴奋性,增强对温度感受器和化学感受器刺激的反应[3]。5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)是抑制性神经递质,广泛存在于哺乳动物组织中,尤其在大脑皮质及神经突触内含量很高。5-HT受体分型比较复杂,已发现7种5-HT受体亚型[4]。5-HT在小鼠CCD模型中引起痛觉与痒觉敏化的作用机制仍不清楚,本研究探讨CCD模型小鼠感受野注射5-HT产生痛觉敏化和痒觉敏化的作用机制。
C57BL/6雄性小鼠24只,体质量25~30 g,分别用于行为学实验(低剂量组6只,高剂量组6只)、免疫荧光实验(左侧为对照侧,右侧为CCD手术侧,n=6)、实时PCR实验(左侧为对照侧,右侧为CCD手术侧,n=6)。小鼠饲养和实验程序严格按照北京协和医学院基础医学研究所的《实验动物护理和使用指南》与相关的道德规范执行,自由饮用清洁食物和水,维持12 h的昼夜循环。
3%异氟醚麻醉小鼠,沿背部中线切口,将腰椎旁的肌肉与乳头突、横突分离后暴露右侧腰椎L3、L4椎间孔。将L形的不锈钢棒(直径=0.3 mm,长度=2 mm)插入每个孔中压迫DRG[7],诱导CCD。然后将切口分层缝合,局部涂抹含有抗生素(TriTop)软膏。……