鹑鸡肠球菌对万古霉素耐药性监测及耐药基因研究

谢 晖，周万青，沈 瀚

0 引 言

肠球菌是临床常见革兰阳性条件致病菌，可导致人体多器官感染。鹑鸡肠球菌(Enterococcusgallinarum，EG)作为肠球菌中少见菌种，近年来临床感染及分离率不断增加[1-3]，可造成泌尿道、腹腔、胆道感染以及败血症等。而耐万古霉素肠球菌(vancomycin resistant enterococci，VRE)的不断检出[4-5]，给临床该类感染带来极大挑战。造成耐药的决定基因包括vanA、vanB、vanC、vanD、vanM等，不同基因的表达可表现对万古霉素和替考拉宁的不同药敏结果[6]，常见vanA介导屎肠球菌大多对万古霉素和替考拉宁呈高水平耐药。鹑鸡肠球菌一般携带染色体介导的万古霉素低水平耐药vanC基因，虽然体外药敏试验可呈现低水平耐药或敏感结果，但不建议临床使用。目前，已有对万古霉素高水平耐药鹑鸡肠球菌菌株临床报道，可能与vanA基因的获得有关[7]。因此，本研究调查我院临床分离鹑鸡肠球菌的耐药性及携带万古霉素耐药相关基因情况,为鹑鸡肠球菌耐药监测及耐药基因的流行提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 菌株收集我院2019年1-12月临床分离非重复鹑鸡肠球菌15株，主要分离自分泌物(2株)、腹水(3株)、胆汁(4株)、尿液(3株)及血液样本(3株)。所有菌株均经Vitek 2 Compact GP板卡鉴定并经VITEK MS质谱复核。粪肠球菌ATCC51299、金黄色葡萄球菌ATCC25923、粪肠球菌ATCC29212为本实验室保存菌株。

1.2 主要试剂与仪器Vitek 2 Compact 全自动鉴定仪及配套 GP 鉴定卡、GP67 药敏卡(法国生物梅里埃公司)；万古霉素 E-test 试纸条(郑州安图生物公司)；DNA提取试剂盒及胶回收试剂盒[天根生化科技(北京)有限公司]；2×Taq Mix(DBI 公司)；营养肉汤(上海科玛嘉微生物技术有限公司)；……