miR-182-5p在膀胱癌中的表达及其机制

郝朝辉 张楠 陈昆 葛雷

作者单位：郑州人民医院泌尿外科（郑州市450000）

膀胱癌是泌尿系统最常见的肿瘤，由于初期发病隐匿，许多患者确诊时已出现癌细胞远处转移，导致预后不良[1]。研究发现包括miR-182 在内的多种miRNA在膀胱癌组织中异常表达，与膀胱癌的发生发展及预后密切相关[2]。miR-182 通过调控不同的靶点参与乳腺癌、肺癌等多种恶性肿瘤的发生发展[3-4]。目前，关于miR-182 在膀胱癌细胞中作用机制的研究较少。本研究旨在对膀胱癌组织中miR-182-5p 及FOXO3的表达进行分析，预测并验证miR-182-5p 与FOXO3的靶向关系，分析抑制miR-182-5p 对膀胱癌细胞增殖、侵袭和凋亡的影响，以期为膀胱癌的靶向治疗提供新思路。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 临床资料及组织标本 选取2017年6月至2019年6月64 例于郑州人民医院经手术切除并经病理学证实为膀胱癌的患者的临床病理资料及组织标本，术前均未行放疗、化疗及其他肿瘤相关治疗。癌组织及癌旁组织标本迅速置于液氮中冻存。根据膀胱癌组织中miR-182-5p 和FOXO3 的表达水平，将64 例膀胱癌患者分别分为miR-182-5p 高表达组和miR-182-5p 低表达组、FOXO3 高表达组和FOXO3 低表达组。本研究经本院医学伦理学委员会批准，患者均签署知情同意书。

1.1.2 细胞及主要试剂 膀胱癌T24 细胞和正常膀胱细胞SV-HUC-1 均购自北京北纳联创生物技术研究院；DMEM 培养基购自美国Gibco 公司；胎牛血清（FBS）、青霉素/链霉素双抗均购自美国Invitrogen 公司；miR-182-5p 模拟物、miR-182-5p 抑制剂及其相应的阴性对照物（miR-NC）均购自广州锐博生物有限公司；Lipofectamine 2000 试剂购自美国Invitrogen 公司；SYBR®Premix Ex TaqTM试剂盒购自日本Takara 公司；……