阻断肝脏Notch1/Jagged1通路对大鼠肝移植急性排斥反应的影响*

白 赫，赖 星，闫 宇

(1.西安医学院附属第一医院普外科，西安 710000；2.重庆市潼南区人民医院肝胆甲状腺乳腺外科 402660；3.西安交通大学第一附属医院乳腺外科，西安 710061)

原位肝移植是治疗晚期肝病的有效方法，但免疫排斥是肝移植后的关键障碍[1-2]。尽管在肝移植患者中广泛应用免疫抑制剂能明显改善预后，但潜在的严重不良反应和急性排斥反应的发生仍然是肝移植患者生活质量低的主要因素[3]。

Notch通路在肝脏发挥免疫耐受功能中是必不可少的[3-5]。Notch在多种细胞类型的多个阶段中起着至关重要的作用，包括免疫细胞。哺乳动物家族中的Notch蛋白包括4种受体(Notch1～4)和一组包含Jagged(Jag1、2)、Delta样成员(DLL1、3和4)的配体[6-7]。Notch受体和配体是跨膜蛋白和细胞外结构域所需的细胞外结构域，这是紧密配体、受体相互作用的结果。这种细胞间相互作用导致受体的切割序列由蛋白酶介导，导致Notch细胞内结构域(NICD)释放到细胞核中[8-9]。

大量实验证明[7,10-11]，阻断Notch1/Jagged1通路可以加强肝脏疾病的炎性反应。在Jagged1与Notch1受体结合后，带切口的NICD可以被释放并转移到细胞核中，并且可以诱导靶基因的激活，分裂Hairy和split-1的增强子(Hes1)，进而调节下游炎性因子的表达。这些效应与Notch1/Jagged1通路效应一致[12]。本研究探讨阻断肝脏Notch1/Jagged1通路对大鼠肝移植急性排斥反应的影响。

1 材料与方法

1.1 动物及主要试剂

雄性Lewis大鼠60只，BN大鼠60只，5～6周龄，体重180～220 g，由重庆医科大学动物中心提供。

Jagged1、Notch1、P65、p-P65、GAPDH、白细胞介素(IL)-1、IL-6抗体均购自英国Abcam公司；PTEN、AKT、p-AKT、JNK、p-JNK、cleaved-caspase3抗体均购自美国CST公司；RNeasy 96试剂盒，PCR试剂盒购自德国DBI公司；逆转录试剂盒、SYBR Green PCR Master MIXPCR试剂盒购自宝生物工程(大连)有限公司；……