T淋巴细胞亚群、血清TNF-α、IgE水平在肺炎支原体合并哮喘患儿表达意义

蔡利超

巩义市人民医院输血科，河南 巩义 451200

肺炎支原体是引起小儿呼吸道疾病的重要病原体之一，其好发于学龄前儿童。相关研究表明，约有3.3%～50%的哮喘与肺炎支原体相关，多认为肺炎支原感染促进了小儿支气管哮喘的发展，而哮喘合并肺炎支原体感染的患儿大多存在免疫系统紊乱［1-2］。因此本研究对各组患儿T淋巴细胞亚群、血清TNF-α和IgE水平进行分析，探讨其在哮喘合并肺炎支原体感染患儿中的表达意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取巩义市人民医院2018年5月—2019年10月期间收治的哮喘患儿70例（研究组），根据是否存在肺炎支原体感染又将研究组分为感染组（哮喘合并肺炎支原体感染）和非感染组（单纯哮喘），其中感染组患儿37例，男25例，女12例；年龄1～12岁，平均年龄（4.77±1.57）岁；病程＜2周22例，病程≥2周15例；肺炎支原体感染轻症（患儿血清检测IgM抗体阳性，热程＜15 d，肺部体征较轻，无明显肺外并发症）25例，肺炎支原体感染重症（患儿血清检测IgM抗体阳性，热程≥15 d，肺部体征较严重，肺外并发症≥2个）12例。非感染组33例，男22例，女11例；年龄1～13岁，平均年龄（4.80±1.60）岁；病程＜2周20例，病程≥2周13例。感染组与非感染组患儿在性别、年龄及病程方面比较无明显差异（P＞0.05）。另外选择同期与研究组性别、年龄相匹配的健康体检儿童35例作为对照组，其中男24例，女性11例；年龄1～14岁，平均年龄（4.85±1.62）岁。纳入标准：（1）感染组和非感染组患儿均符合《诸福棠实用儿科学》［3］中哮喘及肺炎支原体感染诊断标准；（2）年龄≤14岁；（3）无其他呼吸道疾病。排除标准：（1）有先天性心脏病史者；（2）有过敏史及其他变态反应病史者；（3）存在免疫功能缺陷者；（4）智力发育障碍或不能配合完成实验者。患儿家属对本研究知情且同意参加，本研究以上报我院医学伦理委员会并获得批准。

1.2 方法

T淋巴细胞亚群水平检测：抽取患儿空腹静脉血2 ml，标本检测前使用乙二胺四乙酸二钾抗凝进行抗体标记、细胞溶解处理，采用流式细胞术对患儿血液中的CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋指标进行检测，检测仪器采用美国贝克曼库尔特公司提供的CytoFLEX流式细胞仪。

血清TNF-α、IgE水平检测：抽取患儿静脉空腹血3 ml，于3 000 r/min离心15 min后进行血清分离，然后放置于-20℃的冰箱中备测。TNF-α水平采用酶联免疫吸附法进行测定，试剂盒由南京信帆生物技术有限公司提供；IgE水平采用放射免疫法测定，试剂盒由上海恒远生物科技有限公司提供。以上各项均按照试剂盒说明书要求操作。

1.3 观察指标

对比各组患儿T淋巴细胞亚群（CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋）、血清TNF-α和IgE水平。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 研究组与对照组T淋巴细胞亚群及血清TNF-α、IgE水平比较

与对照组相比，研究组CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋较低，CD8＋及血清TNF-α、IgE水平较高，差异具有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 研究组与对照组T淋巴细胞亚群及血清TNF-α、IgE水平比较（±s）

表1 研究组与对照组T淋巴细胞亚群及血清TNF-α、IgE水平比较（±s）

因素年龄性别手术时间糖尿病结石大小尿常规尿培养肾功能不全术中冲洗量术前抗菌药物应用泌尿系统感染β P 0.636 1.783-1.924 1.587 2.168 1.762 1.531-1.814-0.682 2.159 1.182 SE 0.64 0.725-1.121 0.623 1.813 0.831 0.613 0.249 0.734 1.538 0.521 Wald 3.341 3.632 3.264 3.276 15.298 14.689 3.487 53.139 12.047 20.272 3.824 OR 1.218 1.146 0.128 1.185 4.297 0.583 2.158 0.183 1.201 5.176 3.824 0.018 0.003 0.037 0.005 0.028 0.003 0.014 0.000 0.045 0.004 0.020 95%CI 0.896～2.512 1.084～3.485 0.096～1.182 1.074～1.476 2.151～11.079 0.342～0.820 1.736～3.931 0.087～0.269 0.524～5.613 2.231～9.124 1.220～9.038

2.2 感染组和非感染组T淋巴细胞亚群及血清TNF-α、IgE水平比较

感染组CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋低于非感染组，CD8＋及血清TNF-α、IgE水平高于非感染组，差异具有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 感染组和非感染组T淋巴细胞亚群及血清TNF-α、IgE水平比较（±s）

表2 感染组和非感染组T淋巴细胞亚群及血清TNF-α、IgE水平比较（±s）

项目CD3＋（%）CD4＋（%）CD8＋（%）CD4＋/CD8＋TNF-α（μg/L）IgE（g/L）感染组（n=37）52.70±4.25 30.60±2.45 25.50±2.65 1.25±0.40 38.33±3.55 310.45±18.40非感染组（n=33）61.37±4.50 34.42±3.15 23.35±2.15 1.55±0.45 24.04±2.75 245.44±13.30 t P 8.287 5.695 3.698 2.953 18.659 16.758＜0.001＜0.001＜0.001 0.004＜0.001＜0.001

2.3 不同程度肺炎支原体感染患儿T淋巴细胞亚群及血清TNF-α、IgE水平比较

肺炎支原体感染轻症CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋高于重症，CD8＋及血清TNF-α、IgE水平低于重症，差异具有统计学意义（P＜0.05），见表3。

表3 肺炎支原体感染轻、重症T淋巴细胞亚群及血清TNF-α、IgE水平比较（±s）

表3 肺炎支原体感染轻、重症T淋巴细胞亚群及血清TNF-α、IgE水平比较（±s）

项目CD3＋（%）CD4＋（%）CD8＋（%）CD4＋/CD8＋TNF-α（μg/L）IgE（g/L）轻症（n=25）50.35±4.50 35.50±2.70 23.65±3.15 1.45±0.60 29.31±3.22 289.84±13.85重症（n=12）45.75±4.05 28.83±2.12 26.89±2.95 1.04±0.43 50.26±3.65 428.45±20.70 t P 3.001 7.500 3.466 2.383 17.748 24.190 0.004＜0.001 0.001 0.022＜0.001＜0.001

3 讨论

支气管哮喘是由多种严重细胞及因子共同参与的气道慢性变态反应性疾病，其临床表现主要为反复发作的气急、喘息、咳嗽、胸闷等症状，常在清晨及夜间发作［4］。支原体是一种特异性抗原，可通过速发及迟发型变态反应引起哮喘速发及迟发相反应，进而导致气道发生变态反应炎症［5］。陈连保等［6］研究发现，支气管哮喘与支原体感染的肺炎遗传易感性相似，从基因角度来看，说明支气管哮喘的发展与支原体感染有着密切的联系。

在机体诸多淋巴细胞中，T细胞具有参与和介导细胞免疫和调节机体免疫的功能，其主要分为CD4＋和CD8＋两大亚群。其中CD4＋Th细胞可参与协助T、B细胞的免疫应答，CD8＋Th细胞可抑制CD4＋Th细胞的活性，间接阻碍B细胞的分化［7］。Th细胞分为Th1型和Th2型，Th1型的特性为分泌TNF-B、IL-2、IFN-r等促炎因子，能增强CD8＋Th细胞的毒性作用；Th2型则可产生IL-4、IL-5、IL-10等细胞因子，参与体液免疫应答的介导［8］。CD3＋分子可表达于成熟的T淋巴细胞表面，而CD4＋和CD8＋则不能同时表达于成熟T淋巴细胞的表面。CD3＋分子下降表示T淋巴细胞免疫功能降低；CD4＋减少表示B淋巴细胞产生的免疫球蛋白减少和细胞的免疫功能减弱；而CD3＋CD4＋/CD3＋CD8＋比值是机体免疫系统稳定的重要指标，该比值下降可导致免疫功能的下降［9-11］。本次研究结果中，研究组CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋比值低于对照组，感染组低于非感染组，感染轻症低于感染重症；而研究组CD8＋比值高于对照组，感染组高于非感染组，感染重症高于感染轻症；提示哮喘合并支肺炎原体感染患儿免疫功能处于抑制状态，细胞免疫参与该病的发生和发展，原因可能在于支原体侵入后激活机体免疫系统，导致免疫平衡被打破，相关免疫指标发生异常改变，使免疫功能下降。

血清TNF-α主要调节免疫应答，促进细胞分化，其水平升高说明局部炎症反应加重，通过机体的应激产生IgE并参与I型变态反应的介导，导致支气管哮喘的症状加剧；IgE在参与哮喘的发生中有重要作用，其在嗜酸性细胞和肥大细胞表面均有受体，IgE高表达会促进炎症反应［12-13］。本次研究发现，研究组血清TNF-α、IgE水平高于对照组，感染组高于非感染组，感染重症高于感染轻症，说明哮喘的发生与血清TNF-α、IgE水平变化相关，肺炎支原体感染可激活炎症反应，导致血清TNF-α、IgE水平升高，在哮喘的发病过程中起到重要作用。

综上所述，T淋巴细胞亚群、血清TNF-α、IgE水平变化对哮喘合并肺炎支原体感染患儿有重要的评估意义。哮喘患儿在感染肺炎支原体时CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋比值会降低，CD8＋比值及血清TNF-α、IgE水平会增高，其异常程度与肺炎支原体感染程度有关。