HPLC法测定五味消毒饮中菊苣酸的含量

韩惠超 叶世芸 李向东 杨洁

（1.贵州中医药大学 贵州贵阳 550002；2.贵州得轩堂护康药业股份有限公司）

1 前言

五味消毒饮出自清代《医宗金鉴》，具有清热解毒、消散疔疮的功效[1]，为清热解毒的代表方，其方剂由金银花、野菊花、蒲公英、紫花地丁、天葵子等组成。目前，对于其质量标准的研究，尤其是方剂中蒲公英的指标性成分菊苣酸的检测尚未见报道，故本文采用高效液相色谱法对本方中蒲公英的有效成分菊苣酸的含量进行测定。

2 材料和仪器

材料：对照品菊苣酸（成都普瑞法科技开发有限公司，含量98%）。

五味消毒饮处方：金银花、野菊花、蒲公英、紫花地丁、天葵子（药材来源信息见表1）；冰醋酸（色谱纯）、甲醇（色谱纯）；黄酒；娃哈哈纯净水。

表1 药材产地信息

仪器：高效液相色谱仪；煎药壶；电子分析天平；超声波清洗器。

3 方法与结果

3.1 溶液制备

3.1.1对照品溶液制备

精确称取菊苣酸对照品11.6 mg，用甲醇溶解并定容至10 mL容量瓶内，摇匀，充分混合均匀并稀释，制成含量为1.16 mg/mL的对照品溶液，备用。

3.1.2供试品溶液制备

按照表2组方，遵循古籍方法：取金银花11.19g、野菊花、蒲公英、紫花地丁、天葵子各4.48 g浸泡30min，加400 mL水文火煎煮20 min，放入100 mL黄酒武火煎煮5 min，用300目尼龙布过滤，药渣按同法再次煎煮，将2次煎液合并，用水定容至800 mL，共15批水煎液。分别取10 mL，通过0.22μm微孔滤膜进行过滤，备用。

表2 15批方剂药材信息

3.2 色谱条件

色谱柱：Welch UItimate XB-C18（4.6mm×250 mm，5μm）。

流动相：0.5%醋酸水溶液-甲醇梯度洗脱（0～10 min，10%～32%甲 醇；10～20 min，32%甲 醇；20～35 min，32%～46%甲醇）。

柱温：30℃。

流速：1.0 mL/min。

检测波长：320 nm。

进样量：10μL。

3.3 检测波长选择

将一定浓度对照品溶液于波长200～400 nm进行全波段扫描，结果表明在320 nm处有最大吸收。……