Cox A16型手足口病BALB/c乳鼠模型的建立

徐英莉,郭姗姗,耿子涵,庞博,周利润,王雅欣,崔晓兰,时宇静

(中国中医科学院 中药研究所,北京 100700)

柯萨奇病毒A16型是引起手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)的主要病原体之一[1]。COXA16型手足口病感染可以引发手、足、口腔疱疹,少数重症患者可以引发神经系统病变,甚至死亡[2]。目前尚无有效的疫苗和特效药物,构建具有典型临床症状的动物模型是药效及疫苗评价方法的重要环节之一。

目前已建立较为完备的EV71感染动物模型,包括BALB/c[3]、ICR[4]乳鼠模型、恒河猴模型等[5],而COX A16感染动物模型仍需完善。目前已建立通过颅内注射COX A16感染1日龄BALB/c模型[6]、1日龄ICR乳鼠模型[7]以及树鼩模型、猕猴模型等。而已建立的BALB/c乳鼠模型,尚未进行深入的免疫、病理学研究。

本实验借鉴本组EV71型手足口病3日龄BALB/c乳鼠模型[8-9],经腹腔注射建立COXA16型手足口病3日龄BALB/c乳鼠模型,并进行临床症状、体重变化观测,组织病毒载量、趋化因子含量、组织病理病变等指标检测,建立了较完整的COXA16型3日龄BALB/c乳鼠模型,为药物评价及疫苗研发奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物

遗传背景清楚,3日龄,SPF级,BALB/c乳鼠65只(整窝鼠,每窝5只),购于维通利华生物技术有限公司【SCXK(京)2016-0006】。饲养于中国中医科学院中药研究所ABSL-2实验室IVC饲养系统【SYXK(京)2019-0003】。昼夜各半循环照明,湿度50%,温度控制在22～25℃,饲喂普通维持饲料。所有操作符合中国中医科学院中药研究所动物福利伦理委员会要求(审批号:2020D030)。

1.1.2 细胞

非洲绿猴肾细胞(Vero),购于北京北纳创联生物技术研究院(编号:BNCC337868)。肠道病毒Cox A16株购于清华大学生命科学院,经本实验室常规传代、保存。……