◎王 霞,毕桂灿,赖园园
(1.广东食品药品职业学院 生物技术学院,广东 广州 510000;2.华南农业大学新能源与新材料研究所,广东 广州 510000;3.安徽国肽生物科技有限公司,安徽 宣城 242000)
胶原蛋白是人体内一种重要的结构蛋白,广泛分布于皮肤、骨、韧带等组织中[1]。胶原蛋白分子具有独特的三股螺旋结构[2],分子量大难以被人体吸收。胶原寡肽是将胶原蛋白进行水解后得到的小分子产物,易被人体吸收,具有抗氧化、美容、降血压等功效,在化妆品、食品工业、医学材料等领域的应用日益广泛[3]。胶原蛋白水解主要有化学法和酶解法,化学法对寡肽结构和氨基酸破坏严重,导致产物活性低,污染严重;酶解法反应过程温和,对胶原肽结构没有被破坏,极大地保留了产物的活性[4]。本研究以鲮鱼鱼皮为原料,采用SCAU 胶原蛋白复合酶水解制备胶原寡肽,并通过单因素和响应面试验优化其酶解反应条件,为鱼皮酶解制备胶原肽提供一定的技术参考。
SCAU 胶原蛋白复合酶和鲮鱼鱼皮,由华南农业大学生物质工程研究所提供。NaOH、HCl、甲醛均为分析纯,活性炭为食品级。鱼皮洗净,刮去鱼皮表面鱼鳞和脂肪,剪成小块,于50 ℃烘箱烘干,保存于-20 ℃下备用。
D1型自动蒸汽灭菌锅,BT1248 分析天平,1810D型自动双重纯水蒸馏器,XMT-DA 水浴锅。
1.3.1 酶解制备胶原寡肽
称取2 g 干鱼皮,121 ℃高压灭菌15 min,按料液比1∶9(g∶mL)加入无菌水,调节pH 值,加入SCAU 胶原蛋白复合酶液于水浴锅中水解数小时后,加入0.2 g 活性炭粉于沸水浴中保温5 min 终止酶解,冷却至室温,抽滤,滤液冷冻干燥后得胶原寡肽粉。……