基于响应面法对抗肿瘤乳酸菌培养条件的优化

◎靳瑾健，丁 琳，郭 皓

（1.黑龙江省农垦齐齐哈尔管理局中心医院药剂科，黑龙江 齐齐哈尔 161000；2.齐齐哈尔医学院科研处，黑龙江 齐齐哈尔 161006）

乳酸菌是能利用碳水化合物发酵产生大量乳酸的一类细菌[1]，研究表明一些乳酸菌可以调节机体胃肠道微生态平衡，增强免疫力，降低胆固醇，抗氧化抗肿瘤等[2]，因此常被用作功能性食品成分。随着人们健康意识及安全意识的提高，将高效、低毒的乳酸菌作为天然制剂开发已成为研究热点。目前，乳酸菌的抗肿瘤作用机制研究主要集中于阻断自由基链的传递过程，阻断自由基的产生，从而抑制肿瘤发生发展[3]。FUKUI[4]等研究发现乳酸菌可明显降低肿瘤细胞的发生率。AZAM[5]等研究发现乳酸菌培养的上清液可抑制乳腺癌细胞相关基因的表达，由此可见，有些乳酸菌不但本身有抗肿瘤的作用，其代谢产物也具有抗肿瘤的功能[6]。因此本研究选取乳酸菌代谢产物为研究对象，通过单因素试验和响应曲面分析方法优化培养条件，以观察其抗肿瘤活性，为乳酸菌的开发利用提供理论依据，为生产功能性乳制品研发奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

乳酸菌G5（本实验室分离得到的一株活性乳酸菌）；MTT（美国Amersco 公司）、DMEM 培养基（美国Gibco 公司）、酶标仪（F-4500，瑞士Tecan 公司）、大容量高速冷冻离心机（Z36HK，德国Hermle 公司）。

1.2 实验方法

1.2.1 乳酸菌的培养

取甘油保藏的乳酸菌菌株接种于MRS 培养基中，30 ℃、120 r·min-1培养48 h，活化3 代后，用于后续试验。

1.2.2 细胞抗肿瘤实验

乳酸菌抗肿瘤实验采用MTT 实验的肿瘤抑制率为指标进行筛选。……