外排转运蛋白对异莨菪亭体内处置的调控机制研究

应梦迪，谢雨珊，朱丽君，王立萍，区晓君，刘中秋

广州中医药大学中药学院，国际中医药转化医学研究所，广东 广州 510006

异莨菪亭，又名6-羟基-7-甲氧基香豆素，主要分布于木犀科植物苦枥白蜡树Fraxinus rhynchophyllaHance、白蜡树F.chinensisRoxb.、尖叶白蜡树F.szaboanaLingelsh.的树皮中，是中药秦皮的主要活性成分之一[1-2]。异莨菪亭具有较好的抗氧化、抗炎、抗癌和抗病毒等活性[3-6]，易被葡萄糖醛酸转移酶（UDP-glucuronosyltransferases，UGTs）如UGT1A10、UGT1A9和UGT1A6等催化代谢生成异莨菪亭葡萄糖醛酸苷[7]，但异莨菪亭在体内的暴露形式、处置特征及相关调控机制鲜有研究，其成药性数据及特征尚不清晰。乳腺癌耐药蛋白（breast cancer resistance protein，BCRP）和多药耐药相关蛋白2（multidrug resistance-associated protein 2，MRP2）是三磷酸腺苷（adenosine triphosphate，ATP）结合盒转运蛋白家族成员，是影响药物体内处置以及药理作用的关键因素[8-9]。目前BCRP和MRP2对异莨菪亭体内处置的影响及调控机制尚不清楚。因此，本研究采用外排转运蛋白基因敲除小鼠模型，探讨BCRP和MRP2对异莨菪亭及其葡萄糖醛酸化代谢产物体内处置的影响及调控机制。

1 材料

1.1 动物

雄性FVB背景Bcrp1-/-小鼠和Mrp2-/-小鼠购自上海南方模式生物科技有限公司，动物合格证号分别为99612800000279、99612800000278。雄性野生型FVB小鼠来源于杂合Bcrp1-/-小鼠或Mrp2-/-小鼠亲代的野生型子代，Bcrp1-/-/Mrp2-/-小鼠由纯合Bcrp1-/-小鼠和Mrp2-/-小鼠杂交获得，采用PCR-STR技术对实验动物进行基因分型。实验动物周龄为6～8周，饲养于温度（25±2）℃、相对湿度50%～60%的SPF级动物房中。动物实验经广州中医药大学动物伦理委员会批准（批准号2020R0005、2020R0006）。

1.2 药品与试剂

异莨菪亭（质量分数≥98%，批号3620）购自上海诗丹德标准技术服务有限公司，其化学结构见图1；……