正交试验优化白花蛇舌草4种五环三萜类成分提取工艺

林艾和，刘海鹏，张艳娇，黄宽，李蓉，范源，

正交试验优化白花蛇舌草4种五环三萜类成分提取工艺

林艾和1，刘海鹏2，张艳娇1，黄宽1，李蓉1，范源1，2

1.云南中医药大学，云南 昆明 650500；2.云南中医药大学第二附属医院，云南 昆明 650216

优选白花蛇舌草五环三萜类成分山楂酸（MA）、科罗索酸（CA）、齐墩果酸（OA）、熊果酸（UA）的最佳提取工艺。采用HPLC建立MA、CA、OA、UA含量测定方法，以MA、CA、OA、UA含量为评价指标，通过单因素试验和正交试验，考察乙醇体积分数、提取时间、提取次数对提取效果的影响。MA、CA、OA、UA色谱峰分离度良好，分别在0.568～3.408 μg（2＝0.999 0）、0.582～3.492 μg（2＝0.999 0）、0.488～2.928 μg（2＝0.999 9）、0.720～4.320 μg（2＝0.999 2）范围内呈良好的线性关系，平均加样回收率分别为99.09%（RSD＝1.57%）、99.76%（RSD＝1.78%）、100.49%（RSD＝1.66%）、99.52%（RSD＝1.75%）。最佳提取工艺条件为：采用95%乙醇提取70 min，提取3次。本研究优选的提取工艺合理、稳定可行，可用于白花蛇舌草中MA、CA、OA、UA的提取。

白花蛇舌草；正交试验；提取工艺；山楂酸；科罗索酸；齐墩果酸；熊果酸

白花蛇舌草为茜草科植物白花蛇舌草Willd的干燥全草[1]，广泛分布于我国浙江、江苏、广东、江西、云南等地[2]，其性寒，味苦、甘，归胃、大肠、小肠经，具有清热解毒、活血止痛、利尿消肿等功效，临床用于治疗湿热黄疸、小便不利、咽喉肿痛、疮疖肿痛、阑尾炎、毒蛇咬伤、盆腔炎、泌尿系感染等。白花蛇舌草主要含有多糖类、三萜类、有机酸类、黄酮类、蒽醌类、烷烃类、甾醇类、环烯醚苷萜类、生物碱等化学成分[3-5]。其中，三萜类化合物具有抗菌、消炎、抗癌、抗突变、抗氧化等药理作用[6-9]。白花蛇舌草中三萜类化合物多为乌苏烷型和齐墩果烷型，其中2组同分异构体化合物熊果酸（ursolic acid，UA）和齐墩果酸（oleanolic acid，OA）、科罗索酸（corosoic acid，CA）和山楂酸（maslinic acid，MA）含量较高，结构和化学性质相似，色谱峰出峰时间接近，分离测定存在一定难度[10-14]。……