交叉中和血清1型和血清3型鸭甲肝病毒单克隆抗体的制备与鉴定

刘 燕，汤 承，岳 华，王远微*

(1.西南民族大学畜牧兽医学院，成都 610041；2.广汉市农业农村局，德阳 618300)

鸭甲肝病毒(duck hepatitis A virus,DHAV)是引起雏鸭一种急性、高度接触性、高致死性传染病的病原[1]。我国是水禽养殖大国，近年来我国多省出现DHAV的疫情，给养鸭业造成了巨大的损失[2-5]。根据基因序列特征和遗传进化分析可将DHAV分为 3 个血清型，分别是血清1型(DHAV-1)、2型(DHAV-2)和3型(DHAV-3)[6-8]。2012年以前，我国大陆地区流行的DHAV主要是DHAV-1，2013年以后DHAV-3逐渐取代 DHAV-1 成为优势流行毒株，在所有流行毒株中3型DHAV占比57.1%[9]，且常常与DHAV-1混合感染[10]，流行毒株的改变给防控带来了困难。DHAV-2主要在中国台湾省发生，未在大陆地区流行过。鸭甲型肝炎防控以免疫防治为主，随着不同血清型DHAV的流行趋势的变化，疫苗的研究也向两种血清型的二价疫苗方向发展[1，11-13]，并且已有批准的产品上市[14]。但是由于免疫失败、免疫抑制以及母源抗体水平低等原因[15-16]，常常导致雏鸭的发病。所以传统的鸭肝炎卵黄抗体仍然很受养殖企业和养殖户的欢迎，针对DHAV-1和DHAV-3双价卵黄抗体的研究也越来越多[17-18]，并且有双价卵黄抗体获批上市[19]。卵黄抗体虽然具有很好的临床预防和治疗效果，但是如果出现多血清型或者基因型混合感染往往会导致预防和治疗失败，造成损失。如果制备卵黄抗体的抗原所诱导的中和性抗体含量少，在产品效价低的情况下，也可能造成预防和治疗的效果不理想。因此，对于鸭甲型肝炎的防控需要转变策略和思路。广谱中和单克隆抗体是可以中和不同毒株或者不同亚型的抗体，其广谱性能够在一定程度上解决混合感染导致的治疗性抗体失去效果的问题，一些病毒的广谱中和抗体被证明有较好的交叉保护效力[20-22]。……