虎杖苷通过沉默信息调节因子2相关酶3上调PINK1-Parkin线粒体自噬减轻脓毒症小鼠急性肺损伤机制研究

李 涛， 王 香

郴州市第一人民医院 重症医学科， 湖南 郴州 423000

急性肺损伤(acute lung injury，ALI)是指各种肺内或肺外因素引起的以低氧血症为特点的临床综合征。虽然保护性肺通气等生命支持治疗取得一定进步，ALI的治疗效果也较为明确，但由于其发病机制不清，临床仍缺乏特效的治疗措施或药物，其病死率仍居高不下[1]。因此，阐述ALI的发病机制、积极寻找相关的治疗靶点及药物具有重要临床意义。线粒体自噬是一种选择性细胞自噬，细胞通过该机制选择性清除多余或异常的线粒体，以维护细胞内线粒体质量及功能的稳态[2]。在PINK1-Parkin途径线粒体自噬中， PINK1募集细胞质中的Parkin向线粒体移位，而Parkin通过泛素化多种蛋白底物，进而将该线粒体包裹并形成自噬体，最终被溶酶体清除[3]。虎杖苷通过促进Parkin依赖的线粒体自噬减轻脓毒症急性肺损伤小鼠细胞凋亡，但机制尚未阐述清楚[4]。有研究表明，虎杖苷通过激活沉默信息调节因子2相关酶3(silent information regulator factor 2 related enzyme 3,SIRT3)减轻脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)介导的肺泡上皮细胞损伤[5]。同时，SIRT3参与PINK1-Parkin线粒体自噬的调节[6]。本研究旨在探讨虎杖苷是否通过SIRT3促进PINK1-Parkin线粒体自噬，进而减轻脓毒症小鼠急性肺损伤。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 实验试剂 线粒体分离试剂盒、免疫共沉淀试剂盒购于上海碧云天生物科技有限公司。兔抗小鼠SIRT3、磷酸甘油醛脱氢酶、COX Ⅳ、PINK1、Parkin、叉头框蛋白O3(forkhead box protein O3,FOXO3)单克隆抗体，以及肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、白细胞介素(interleukin，IL)-1、IL-6酶联免疫吸附测定试剂盒购于武汉ABclonal公司。SIRT3去乙酰化酶活性检测试剂盒购于英国Abcam公司。……