转录因子EB通过激活自噬及溶酶体功能改善缺血性卒中小鼠神经功能*

周大旺 ， 张晨禹 ， 黎 博 ， 张 强 ， 刘 聪 ，詹浩洪 ， 胡春林 △， 廖晓星 ，4△

（1中山大学附属第七医院急诊与灾难医学中心，广东深圳518107；中山大学附属第一医院2急诊科，3卫生部辅助循环重点实验室，广东广州510080；4中山大学深圳研究院，广东深圳518057）

根据2019 年全球疾病负担报告，在导致全球疾病负担增加的疾病中，脑卒中是仅次于缺血性心脏病和糖尿病的全球性疾病［1］。脑卒中分为出血性卒中及缺血性卒中，其中以缺血性卒中为主，具有较高的致死率和致残率［2-3］。缺血性脑损伤会引发一系列病理改变，包括兴奋性毒性、细胞凋亡和炎症反应等，最终导致神经元死亡［4］。研究表明自噬及溶酶体功能在脑缺血性损伤中扮演着重要角色，不仅参与缺血损伤的发生、发展过程，还有可能作为干预、调控的切入点来影响甚至决定受损神经元的转归［5］。转录因子 EB（transcription factors EB，TFEB）作为调控自噬及溶酶体功能的关键因子［6］，可能成为改善神经系统疾病患者预后的潜在治疗靶点［7-10］。本项工作首先通过构建不同梗死时间段永久性大脑中动脉阻塞（permanent middle cerebral artery occlusion，pMCAO）模型，观察TFEB介导的自噬及溶酶体功能在pMCAO 模型中的改变，随后通过敲减和过表达TFEB，观察其对pMCAO 模型小鼠神经功能的影响，为缺血性卒中寻找新的治疗靶点。

材料和方法

1 实验动物

60只SPF 级C57BL/6雄性小鼠，周龄8～10周，体重25～30 g，购自江苏集萃药康生物科技有限公司，动物生产许可证号为SCXK（苏）2018-0008。其中15只用于构建不同梗阻时间pMCAO 模型，分为假手术（sham）组、梗阻2 h组、梗阻4 h组、梗阻8 h组和梗阻24 h 组，每组 3 只；……