慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者血清对PM2.5所致MH-S细胞炎症的影响及salubrinal的作用*

王 正， 郝赫莉， 王晓彤， 武思羽， 阎锡新， 张霄鹏， 孟爱宏△

（1河北医科大学第二医院北院区呼吸与危重症医学科，河北石家庄050004；2河北医科大学第二医院呼吸与危重症医学一科，河北石家庄050000；3河北省人民医院胸外二科，河北石家庄050051）

感染所致炎症是慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）患者病情急性加重住院的主要原因。细颗粒物（particulate matter 2.5，PM2.5）是指大气中直径≤2.5 μm 的颗粒物与COPD 存在密切关联，但致病机制尚不完全清楚。PM2.5 刺激可诱发与炎症有密切关系的内质网应激（endoplasmic reticulum stress，ERS）。C/EBP 同源蛋白（C/EBP homologous protein，CHOP）是ERS 中的关键分子，研究证实CHOP 活化还具有促炎作用。磷酸酶抑制剂salubrinal 可通过抑制PERK-eIF2α 通路中eIF2α 的去磷酸化，加速堆积的未折叠蛋白的分解，缓解ERS，减少细胞CHOP 的表达，但salubrinal能否通过缓解ERS而影响PM2.5导致的炎症尚不清楚。本研究将COPD 急性加重期（acute exacerbation of COPD，AECOPD）患者或健康志愿者血清与PM2.5 共同刺激小鼠肺泡巨噬细胞株MH-S，检测MH-S 细胞组蛋白脱乙酰酶2（histone deacetylase 2，HDAC2）活性及炎症因子白细胞介素17（interleukin-17，IL-17）的分泌，模拟AECOPD 炎症状态下PM2.5对MH-S细胞的影响，进一步以salubrinal干预PM2.5处理的 MH-S 细胞，探讨 salubrinal 在 PM2.5 所 致MH-S细胞损伤中的作用。

材料和方法

1 实验材料

1.1 实验仪器 Mk3 全自动酶标仪（芬兰雷博）；共聚焦显微镜（Zeiss）；北京四环科学仪器厂TLL-C 台式高速冷冻离心机（北京四环科学仪器厂）。

1.2 主要材料与试剂 永生化小鼠肺泡巨噬细胞株MH-S 购自ATCC。IL-17 ELISA 试剂盒购自北京四正柏生物科技有限公司；HDAC2 活性比色法定量检测试剂盒购自上海杰美基因医药科技有限公司；细胞活力及毒性检测试剂盒（CCK-8）购自东仁化学科技（上海）有限公司；健康志愿者血清取自健康志愿者；……