刍痘灵活疫苗免疫效果评价

王 力，贺 文，王丽娟，许 伟，石 鹏，高武臣，马 杰

（1.庆阳市动物疫病预防控制中心，甘肃 庆阳 745000；2.华池县动物疫病预防控制中心，甘肃 庆阳 745600；3.庆城县动物疫病预防控制中心，甘肃 庆阳 745100）

1 材料与方法

1.1 试验群体与分组

场群1为华池县怀安乡糖坊咀村一养羊农民专业合作社，饲养动物为湖羊，存栏1 200只，随机选取6月龄临床健康、膘情良好的湖羊120只，随机分成4组进行免疫试验。A组免疫刍痘灵活疫苗、B组免疫小反刍兽疫活疫苗、C组免疫山羊痘活疫苗、D组免疫小反刍兽疫活疫苗+山羊痘活疫苗。

场群2为庆城县南庄乡六寸塬村一养羊农民专业合作社，饲养动物为湖羊，存栏2 100只，随机选取6月龄左右临床健康、膘情良好的湖羊120只，随机分成4组进行免疫试验。E组免疫刍痘灵活疫苗、F组免疫小反刍兽疫活疫苗、G组免疫山羊痘活疫苗、H组免疫小反刍兽疫活疫苗+山羊痘活疫苗。

其中，小反刍兽疫活疫苗免疫组、山羊痘活疫苗免疫组、小反刍兽疫活疫苗+山羊痘活疫苗组合免疫组为对照组。试验羊只前期未免疫过小反刍兽疫、羊痘等疫苗。

1.2 羊只管理

为方便试验开展，试验羊全部舍饲，根据分组情况对试验羊只进行喷码标记，不同试验组羊只分栏饲养。每天饲喂3～4次、自由饮水，注重日常清洁和圈舍消毒，及时清理羊粪，每周消毒1～2次，重点消毒羊舍内部过道、栏杆、墙面以及羊床漏缝板。

1.3 疫苗使用

刍痘灵活疫苗由国药集团扬州威克生物工程有限公司生产，尾部皮内注射，剂量1头份/只，生产批号为C0920009，有效期至2022年2月15日。小反刍兽疫活疫苗由天康生物股份有限公司生产，颈部肌肉注射，剂量1头份/只，生产批号为202026-1，有效期至2022年7月1日。山羊痘活疫苗由山东绿都生物科技有限公司生产，尾部皮下注射，剂量1头份/只，生产批号为2005005，有效期至2021年11月17日。免疫试验使用的各种疫苗均严格按照说明书进行操作，注射前后采取消毒措施，用注射器吸取疫苗液后确保排空空气，并且保证免疫同组羊只注射同种疫苗量一致，做到“一畜一针”，注射完成后规范处置废弃物。

1.4 试验安全性和生产性能评价

在免疫后3 d内以及第7天、第14天、第21天、第28天持续对各试验组的羊只进行体温监测，每天多次观察试验组的羊只精神食欲状况、有无不良反应和应激死亡等现象，详细做好各项安全性评价记录。每周查看羊只膘情，称量体重并记录。

1.5 采样检测与结果判定

分别于免疫前和免疫后第7天、第14天、第21天、第28天采集血清在实验室进行免疫抗体效价检测，试验过程每次采样保证羊只与信息对应一致，详细记录采样登记表，采样、实验室检测期间注重人员防护，严格穿戴防护服、口罩、鞋套等。试验羊只在疫苗试验前期经过布鲁氏菌病抗体检测，结果均为阴性。小反刍兽疫抗体检测采用小反刍兽疫阻断ELISA抗体检测试剂盒，批号为020172008，由青岛立见诊断技术发展中心生产；山羊痘免疫抗体检测采用羊痘间接ELISA抗体检测试剂盒，批号为20200904119-1，由中国农业科学院兰州兽医研究所生产。所有试剂盒的使用均严格按照说明书进行操作和试验结果判定。在保证各项试验成立的前提下，小反刍兽疫被检血清PB（阻断率）>50，结果为抗体阳性，否则为阴性；羊痘间接ELISA抗体检测被检血清OD450值≥0.25时，结果为抗体阳性，如果被检血清OD450值介于0.2和0.25之间，重复检测1次，若复检血清OD450值≥0.23，则判定为抗体阳性，否则为阴性。免疫羊群抗体阳性率（免疫合格率）≥70%，判定为疫苗免疫合格。

2 结果

各试验组羊只免疫前通过采集血清进行小反刍兽疫、羊痘抗体检测，结果均为阴性。

2.1 刍痘灵活疫苗免疫组抗体检测

免疫第7 天小反刍兽疫抗体阳性率为93.33%，羊痘抗体阳性率为36.67%；第14天小反刍兽疫抗体阳性率为100%，羊痘抗体阳性率为93.33%；第21天小反刍兽疫抗体阳性率为100%，羊痘抗体阳性率为95.00%；第28天小反刍兽疫抗体阳性率为96.67%，羊痘抗体阳性率为86.67%（见表1）。

表1 刍痘灵活疫苗免疫效果及对照组实验室检测数据汇总

2.2 小反刍兽疫活疫苗免疫组抗体检测

免疫第7天抗体阳性率为81.67%，第14天抗体阳性率为98.33%，第21天抗体阳性率为98.33%，第28天抗体阳性率为96.67%（见表1）。

2.3 山羊痘活疫苗免疫组抗体检测

免疫7天后抗体阳性率为28.33%，第14天抗体阳性率为90.00%，第21天抗体阳性率为91.67%，第28天抗体阳性率为90.00%（见表1）。

2.4 小反刍兽疫活疫苗+山羊痘活疫苗组合免疫组（同时分点注射）抗体检测

免疫第7 天小反刍兽疫抗体阳性率为85.00%，羊痘抗体阳性率为45.00%；第14天小反刍兽疫抗体阳性率为98.33%，羊痘抗体阳性率为93.33%；第21天小反刍兽疫抗体阳性率为98.33%，羊痘抗体阳性率为86.67%；第28天小反刍兽疫抗体阳性率为95.00%，羊痘抗体阳性率为83.33%（见表1）。

3 讨论与结论

在免疫后3 d内以及第7天、第14天、第21天、第28天持续对各试验组羊只进行体温监测，以及每天对试验羊只进行表象观察，各组试验羊只免疫后每次测量体温均属于正常范围，整体精神状态良好，食欲正常，膘情较好，没有出现明显的不良反应和应激死亡等现象。

分别于免疫后第7天、第14天、第21天、第28天进行采样实验室检测，统计发现，试验羊群免疫刍痘灵活疫苗后第14～21天小反刍兽疫、羊痘抗体阳性率达到峰值，分别为100%和95%，第28天检测，两种疫病抗体阳性率有所下降，但仍处于较高水平。

刍痘灵活疫苗免疫较单苗免疫（小反刍兽疫活疫苗免疫、山羊痘活疫苗免疫）抗体产生更快，免疫第14～21天抗体阳性率更高；刍痘灵活疫苗免疫较小反刍兽疫活疫苗+山羊痘活疫苗组合免疫（同时分点注射）抗体阳性率略高；单苗免疫较刍痘灵活疫苗免疫、小反刍兽疫活疫苗+山羊痘活疫苗组合免疫（同时分点注射）抗体产生较慢，但抗体水平达到峰值后衰减较慢。

从试验情况来看，免疫刍痘灵活疫苗羊只小反刍兽疫、羊痘免疫抗体阳性率都较高，且未见明显的不良反应，膘情保持较好，证明了刍痘灵活疫苗有较好的安全性和较强的免疫效果，加之经济性等优势，具有一定的推广意义，建议先小范围免疫使用，若各方面表现良好，可逐步扩大应用范围。