香蕉磷脂酶D的纯化与生化特性分析

何雪梅，唐雅园，孙 健，李 丽，向 昱，杨兆杏，赵承刚，韦 珍，唐 杰*

(1.广西农业科学院农产品加工研究所，广西 南宁 530007； 2.广西果蔬贮藏与加工新技术重点实验室，广西 南宁 530007；3.广西香蕉保鲜与加工工程技术研究中心，广西 南宁 530007；4. 河池市农业技术推广站，广西 河池 547000)

【研究意义】磷脂酶D(PLD)即磷脂酰胆碱磷脂水解酶(EC3.l.4.4)，是植物组织中普遍存在的一类水解酶，能催化水解磷脂末端的磷酸二酯键生成磷脂酸(PA)和亲水性胆碱等，在保持细胞膜基本结构与生理功能方面具有重要调控作用，其在植物种子萌发、器官衰老及逆境胁迫中的作用已成为研究热点[1-2]。香蕉为芭蕉科(Musaceae)芭蕉属(Musa)单子叶植物，也是全球鲜销量最大的水果品种之一[3]，其果实在采收与运输过程中冷害、病害及机械伤等造成的损失相当严重，其中我国香蕉采后损耗率在30%以上[4]。已有研究表明，香蕉PLD对香蕉衰老劣变和采后逆境发挥着重要的调控作用[5]。因此，建立香蕉PLD的分离纯化方法并分析其生化特性，对系统研究香蕉PLD在香蕉采后贮运保鲜中的作用具有重要意义。【前人研究进展】目前，有关香蕉PLD的研究主要集中于PLD基因克隆和表达在香蕉冷害、机械伤等逆境胁迫中的作用等方面。Li等[5]通过RT-PCR方法获得PLDα(MaPLDα)基因，并分析其基因序列，发现MaPLDα mRNA和PLD活性在发育旺盛的组织(叶片、花和茎)中表达量较高，低温能激发香蕉MaPLDα基因表达，说明MaPLDα基因表达与香蕉的低温抗性有一定关系。He等[6]的研究也证实低温能激发香蕉PLD活性，延长贮藏期。……