TRAIL基因多态性及其血清水平与急性白血病的相关性研究

闫晓华，刘瑞磊，彭宝相，张纪云 ，孙运芳，程振娜

(1山东医学高等专科学校，山东 临沂 276000；2临沂市人民医院；3临沂市肿瘤医院)

急性白血病(Acute leukemia，AL)分为急性髓细胞白血病(Acute myeloid leukemia，AML)和急性淋巴细胞白血病(Acute lymphoblastic leukemia，ALL)，是一类死亡率较高的血液系统恶性肿瘤。近年来，其发病率逐渐增高，主要诱发因素有物理、化学、生物及遗传因素等。肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(Tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand，TRAIL)是肿瘤坏死因子超家族成员，有研究显示其在肿瘤防御方面有一定作用。本研究探讨TRAIL与AL的相关性。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2018年1月—2020年5月本院就诊及住院的85例AL患者为AL组，其中男52例，女33例；年龄18～67岁，平均(41.1±11.9)岁；AML 51例，ALL 34例。纳入标准：均为原发性病变；采样前均未经放疗及化疗。另选同期来本院的体检者80例作为对照组，其中男50例，女30例，年龄18岁～65岁，平均(40.3±12.6)岁。纳入标准：对照组血常规、尿常规、粪便常规、生化检查、影像学检查均为正常。排除标准：两组均排除合并心、脑、肝、肾、肺及免疫性疾病患者。所有研究对象间无血缘关系，两组年龄、性别比等无统计学意义(P>0.05)，具可比性。所有参与研究者均经知情同意。

1.2方法

1.2.1标本采集 空腹采血4 ml分置2管中，其中1管为EDTA抗凝血2 ml，-20℃保存；另1管为肝素抗凝血2 ml，离心取血清，-20℃保存。

1.2.2仪器与试剂 PCR试剂、全血基因组DNA提取试剂盒(Tiangen 公司)，限制性内切酶(Tas I、Rsa I，Fermentas公司)，紫外显像系统(美国Bio-tech公司)。

1.2.3TRAIL基因多态性分析 ①基因组DNA的提取：按照试剂说明提取全血基因组DNA，提取产物通过核酸浓度检测仪和琼脂糖凝胶(EB)电泳验证。②PCR扩增目的基因片段：上游引物5′-AACATCTTCT-GTCTTTATAATC-3′，下游引物5′-AAATAACACGTACTTACTGAAG-3′(上海博亚公司)，扩增片段长度为484 bp，扩增产物用2%琼脂糖凝胶电泳验证。③……