蜘蛛抱蛋(Aspidistra elatior)炭疽病病原菌的分离与鉴定

黄钰婷， 孙 洁， 张慧娟， 朱 晏， 蒋 明

(台州学院 生命科学学院，浙江 台州 318000)

蜘蛛抱蛋(Aspidistraelatior)又名一叶兰、土蜈蚣、苞米兰和箬叶等，为百合科(Liliaceae)铃兰族(Convallarieae)蜘蛛抱蛋属多年生常绿宿根草本[1]。蜘蛛抱蛋叶片硕大、姿态优美、花形奇特，具有较好的观赏价值，常用于盆栽和公园地植[2]；蜘蛛抱蛋在光照不良的环境中有较好的固碳释氧和增湿降温能力，且其自然挥发物对金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)和黑曲霉菌(Aspergillusniger)等有显著的抑制作用，该植物在室内美化方面具独特的优势[3]。蜘蛛抱蛋的根茎可药用，提取物中富含抗氧化剂和抗菌成分，具有活血化瘀、清热解毒、抗菌消炎等功效[4-5]。笔者调查发现，蜘蛛抱蛋炭疽病的发生十分严重，发病时叶面产生褐色病斑，后逐渐扩大蔓延至整张叶片，影响植株的生长和发育，也影响观赏价值。

植物炭疽病是世界性病害之一，危害多种野生植物和栽培植物，该病主要由炭疽菌属(Colletotrichum)真菌引起，可侵染植物的所有部位，尤其是地上部分[6-8]。近年来，有关蜘蛛抱蛋的研究主要集中在栽培管理、药理作用和化学成分等方面[2，5，9]，而与炭疽病相关的研究未见报道。本研究以蜘蛛抱蛋炭疽病病叶为材料，在病原菌的分离、纯化、致病性测定、形态学特征观察的基础上，克隆核糖体转录间隔区(ribosomal DNA internal transcribed spacer，ITS)、肌动蛋白基因(actin，ACT)、3-磷酸甘油醛脱氢酶基因(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH)、钙调蛋白基因(calmodulin，CAL)，进行多基因联合鉴定，以明确炭疽病病原真菌的种类，为后续开展病害有效防治和致病机理研究提供参考。

1 材料与方法

1.1 样本的采集、病原菌的分离与纯化

蜘蛛抱蛋病叶采自不同的公园和中学校园，共采集到6份样品，带回实验室后置于4 ℃冰箱备用。……