木聚糖酶产生菌的筛选

薛云霞 范继红 罗丞燕 杜国丰

（营口理工学院化学与环境工程学院，辽宁 营口 115014）

木聚糖酶是一类重要的木糖苷键水解酶，能特异降解植物中的木聚糖[1]。木聚糖虽然广泛地存在于秸秆，玉米芯等农副产品中，但未能被充分利用，如在造纸工业中，富含木聚糖的废料再利用度低，若直接排放会造成水体富营养化、污染环境问题[2-3]。本研究秉持“以废治废”的环保新理念，从堆积过玉米秸秆的土样中筛选出能产生木聚糖酶的菌株，木聚糖酶菌株可将木聚糖进一步降解成木寡糖和木糖进行高值化利用，为工业生产中有用产品，其潜在的经济效益和环保意义是重大的[4-6]。

一、材料与方法

（一）材料与试剂

1.样品

土壤样品：采自辽宁营口东站附近的玉米秸秆堆积处、种植玉米的田地等处的土壤。

2.试剂

木聚糖（纯度≥90%）：麦克林公司；D -木糖（纯度≥99%）：天津福晨化学试剂厂；刚果红（生物染料）：麦克林公司；3,5-二硝基水杨酸（纯度≥98%）：上海国药集团化学试剂公司。其他试剂均为市售分析纯。

3.培养基

富集培养基：木聚糖10g/L,蛋白胨5g/L,NaCl 5g/L。

初筛培养基：木聚糖5g/L,KNO30.2g/L,MgSO40.2g/L,NaCl 0.5g/L,K2HPO40.5g/L,琼脂20g/L。

PDA 斜面培养基：称取200g 马铃薯，洗净去皮切碎，加水1000mL 煮沸，纱布过滤，滤液补足1000mL，再加20g 葡萄糖和20g 琼脂，充分溶解后趁热纱布过滤，分装试管，每管约5-10mL，121℃灭菌20min 取出试管摆斜面，冷却后储存备用。

复筛培养基：木聚糖10g/L,(NH4)2SO41.5g/L,NaCl 5g/L,K2HPO40.5g/L,MgSO40.2g/L。

（二）仪器与设备

FA2104N 电子天平：上海方瑞仪器有限公司；VIS-7220N 可见光分光光度计：上海方瑞仪器有限公司；DL-1 电子万用炉：北京市永光明医疗仪器厂；HH-6 数显电子恒温水浴锅：常州国华电器有限公司；……