基于COⅠ基因的储粮象甲害虫的分子检测技术研究

吴 芳，龚 殊，严晓平

(1.宜宾学院质量管理与检验检测学部，四川 宜宾 644000； 2.中储粮成都储藏研究院有限公司，四川 成都 610091)

鞘翅目象甲科储粮害虫包括阔鼻谷象、罗望子象、谷象、米象和玉米象[1]，其中谷象属的米象、玉米象和谷象是世界分布的储粮大害虫[1-2]，尤其是玉米象为头号储粮大害虫[1]。米象和玉米象由于形态和生态分布都非常接近，仅仅从形态上对它们进行鉴别非常困难。探索新的方法弥补形态鉴定的不足显得尤为重要[3]。随着分子生物学技术在昆虫分类中的广泛应用，为储粮害虫的快速准确鉴定提供了新的方法。线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(mtDNACOⅠ)基因是目前测序最多，结构和动力学研究最为清楚的基因之一，其结构相对保守，种间变异较多，能够提供丰富的系统发育信息，自Hebert等[3]首次提出利用线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ基因作为DNA条形码以来，该技术已在鳞翅目[4-6]、鞘翅目[7-8]、半翅目[9]、等翅目[10]和弹尾目[11]昆虫的分类鉴定中得到广泛应用。近年，该技术开始在储粮害虫书虱[12-13]、扁甲类[14-15]、象甲类[16]的鉴定方面得到应用。本研究以3种常见象甲类储粮害虫为研究对象，对其COⅠ基因片段进行研究，以期实现DNA条形码技术对储粮象甲种类的快速鉴定，弥补形态鉴别存在的不足。

1 材料与方法

1.1 研究材料

供试材料为采自中国、印度、泰国、澳大利亚和德国5个国家的米象、玉米象和谷象，共38个样本，以采自四川峨眉的苜蓿叶象作为参照扩增，标本原始采集地见表1。所有样本都经形态学鉴定，保存于中国储粮害虫防治应用技术研究中心-20℃低温冰箱中。……