高盐诱导下以 TonEBP/NF-κB 通路为基础的小鼠巨噬细胞表型偏移机制的研究

朱 哲，杨国红，赵季红

长期过量的食盐摄入，不仅会增加患高血压的风险，还可对相关靶器官造成损害。多项研究表明，盐敏感性高血压等心血管疾病的发生、发展及其靶器官损害的病理过程与巨噬细胞表型偏移密切相关。基于当前对巨噬细胞的研究，通常将其分为M1型和M2型两种亚型。本课题组前期研究发现，高盐喂养下小鼠巨噬细胞表型向M1型偏移可加重机体炎性反应，升高血压并促进小鼠左心室重塑。在后续的细胞实验中本课题组发现高盐刺激下小鼠巨噬细胞向M1型发生偏移的同时伴随张力应答增强子结合蛋白(tonicity-responsiveelement binding protein，TonEBP)与核因子-κB(nuclear factor-κB，NF-κB)的表达增强，且二者表达水平呈正相关。TonEBP可在高渗条件下被激活，参与维持哺乳动物细胞内渗透压力的平衡。位于TonEBP下游的NF-κB是细胞内重要的核转录因子，广泛参与机体各类炎性反应。对于高盐刺激下巨噬细胞表型偏移是否和TonEBP/NF-κB信号通路激活有关，通过调节此通路是否可以干预巨噬细胞表型偏移方向的研究还未有报道。本研究通过探讨高盐刺激下巨噬细胞表型偏移的可能机制，为进一步研究巨噬细胞相关心血管疾病的防治提供新的实验依据。

1 材料与方法

1.1 一般材料 Raw264.7细胞(小鼠巨噬细胞)由武警特色医学中心实验室提供。TonEBP基因沉默慢病毒载体设计构建与包装服务由上海合生基因生物公司提供；氯化钠购自天津风船化学试剂科技公司；胎牛血清(FBS)、高糖培养液(DMEM)购自美国Gibco公司;引物设计合成由北京六合华大基因科技有限公司提供；……