黄芩等10味中药对蜜蜂蜂房球菌的抑菌评价

柯尝玲，付戴波，陈桂平，张串联，邹雨妃，曹远东

（1.九江市农业科学院，江西九江 332000；2.九江市畜牧兽医局，江西九江 332000，3.江西省养蜂研究所，江西南昌 330000，4.江西嘉博生物工程有限公司，江西都昌 332600）

蜜蜂蜂房球菌引起的烂子病是我省中蜂养殖的主要病害之一，每年春秋蜜蜂繁殖季节频发，给中蜂养殖带来很大的损失[1]。长期使用抗生素后，治疗效果越来越差。中药在替代抗生素方面具有天然的优势。基于此，试图通过体外抑菌敏感试验，从10 味常见常用药材中筛选出对蜂房球菌高效敏感的药物，为开发新药提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 供试药材

黄芩、黄连、马齿苋、金银花、蒲公英、地锦草、栀子、车前草、板蓝根、大青叶，均由江西嘉博生物工程公司提供，所有药材均符合生药质量标准。

1.1.2 培养基

蛋白胨1 g、半胱氨酸0.02 g、葡萄糖0.5 g、果糖0.5 g、可溶性淀粉1 g，加纯化水至100 ml（用1 mol/L KH2PO4调pH 至6.6）；固体培养基按以上成分比例，增加琼脂2 g。

1.1.3 菌株

蜜蜂蜂房球菌2 株，从我省中蜂养殖场病料中分离出的优势菌株（BCDwn 株、BCDrj 株）。

1.2 方法

1.2.1 中药原液的制备

参照文献方法[1]将上述药材分别称取100 g，加入3 倍的纯化水，浸泡1 h，加热至沸腾后用文火维持煎煮30 min，始终保持3 倍量水，用4 层纱布过滤，滤渣加2 倍水再煎煮30 min。合并两次滤液，减压浓缩至100 ml，配成100%原药液（每ml相当于1 g 生药），将所得原药液用1 000 r/min离心10 min，取上清液作为供试液，灭菌，冷却后，置于4℃冰箱中保存备用。

1.2.2 菌液的制备

经斜面培养复壮2 次后，挑取一环斜面菌种，接种至液体培养基，在加10%CO2的厌氧条件下，34℃～35℃培养24 h；……