汤 电,郑江涛,李奇润,谭 涛
[礼蓝(上海)动物保健有限公司,上海 200003]
1.1.1 所需材料
食盐,尿素,生理盐水,一次性乳胶手套,一次性水杯,记号笔,研钵,医用纱布,50 mL烧杯(或输精瓶)若干,胶头滴管(或移液器带吸头),载玻片,盖玻片,光学显微镜。
1.1.2 溶液制备
⑴饱和盐水溶液的配制:每升水(加热)中加入380 g食盐,充分搅拌直至完全溶解,做好标记备用。
⑵尿素溶液的配制:每升水(加热)中加入1 000 g尿素,充分搅拌直至完全溶解,做好标记备用。
1.1.3 粪便样品采集
2021年3月,湖南省娄底市某规模化猪场的仔猪感染等孢球虫。选取7~21日龄仔猪所在产床,收集不同物理性状的新鲜粪便,装入一次性水杯中,将从每窝或每个产床采集的粪便装入同一个杯子中,作为1份样品供检测,每份样品收集3 g~5 g,记录仔猪日龄和对应母猪的耳号,共采集样品30份。
⑴研磨:将粪便样品倒入研钵中,均匀研磨成糊状,使粪便中的球虫卵充分释放出来。
⑵分组:将研磨后的粪便样品一分为二,分别用两种溶液搅拌溶解。
⑶过滤:将医用纱布叠成4~6层,用于过滤研磨后的粪便样品,球虫卵囊可穿过纱布进入滤液,随后弃残渣,取滤液。
⑷漂浮:将滤液摇匀,倒入烧杯(或输精瓶)中,加入相应的溶液,确保烧杯(或输精瓶)中的溶液满而不溢。加入饱和盐水溶液的烧杯(或输精瓶)静置30 min,加入尿素溶液的烧杯(或输精瓶)静置10 min。
⑸制片:用胶头滴管(或移液器)分别从烧杯(或输精瓶)所盛溶液液面的不同点吸取少量(约20 μL)液体,并将液体滴在载玻片上,盖上盖玻片,做好标记待检,注意在盖盖玻片时不要产生气泡。……