猪瘟病毒对ST细胞NF-κB信号通路炎性因子表达量的影响

杨齐之贤，易蓉鑫，周祖灵，孙永科，杨玉艾

(云南农业大学动物医学院，云南昆明 650201)

猪瘟(Classical swine fever，CSF)是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus，CSFV)引起的高度接触性、致死性传染病，我国猪瘟呈现向非典型性方向发展的特征[1]。研究表明，核因子-κB(nuclear factor-kappa B，NF-κB)与病毒感染有着密切的关系，在抗病毒免疫和炎症反应中也发挥着重要的调控作用[2]。

当细胞处于未激活状态时，NF-κB与IκB蛋白以无活性的方式存在于细胞中，当IKK复合物接收的信号被传递到IκB蛋白上，使IκBα蛋白磷酸化后降解，活化p65蛋白(RelA)，p50/p65结合而成的异二聚体表现出NF-κB活性从而被转移到细胞核内，诱导靶基因的表达，NF-κB通路的经典途径被激活[3]，与经典途径相关的基因是NFKBIA、IKBKB、RelA基因。IKKα蛋白是IKK复合物的亚基之一，IKKα能够调控NF-κB的活性，并且激活NF-κB信号通路下游相关基因的表达[4]，是非经典途径必须亚基之一，因此，检测编码IKKα的CHUK基因是关键。

Lee S M等[5]研究表明，猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)激活了NF-κB途径。Chen L J等[6]研究表明，CSFV感染PK-15细胞不会影响NF-κB信号通路，并且p65/RelA没有明显从细胞质中转移至细胞核。Bensaude E等[7]研究表明，CSFV感染会激活NF-κB信号通路，并导致各种促炎因子上调。目前，关于CSFV感染猪睾丸上皮细胞系(swine testis，ST)对NF-κB相关基因表达的影响还尚未见报道，CSFV感染ST细胞后是否激活了NF-κB通路的经典途径和非经典途径还不明确。因此，本试验采用荧光定量PCR的方法检测CSFV感染ST细胞后NF-κB信号通路CHUK、IKBKB、NFKBIA、RelA基因mRNA表达量的变化情况，从基因水平分析CSFV感染ST细胞后对NF-κB信号通路上、下游的影响[8-9]，并通过Western blot检测了p65蛋白在胞浆和胞核内的表达，进一步验证CSFV感染ST细胞后激活NF-κB通路的经典途径。……