LncRNA FAM225A靶向miR-1-3p基因调控结直肠癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡

陈文霞 刘艳红 肖兴国 张磊 王琳 吴慧丽

(郑州大学附属郑州中心医院消化内科，河南 郑州 450007)

结直肠癌(CRC)是消化道常见的恶性肿瘤之一，手术及放化疗虽改善了CRC患者总体存活率，但仍需寻找新的疗效更好的治疗手段，针对CRC发病特点的定点靶向治疗对CRC的治疗和预后具有重要意义〔1，2〕。研究发现LncRNA参与了CRC的发生发展，可为CRC诊断和治疗提供新手段〔3〕。有研究报道LncRNA FAM225A在慢性阻塞性肺疾病患者中表达上调〔4〕。FAM225A在胃癌细胞中也高表达，与胃癌的发生发展可能相关〔5〕。然而FAM225A在CRC中的表达及其对CRC细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响也尚未清楚。研究发现miRNA也与CRC进展有关〔6〕。有报道发现miR-1-3p在CRC中显著下调，且可能通过多种生物学方法抑制CRC〔7〕。上调miR-1-3p抑制膀胱癌细胞的增殖，迁移和侵袭〔8〕。过表达miR-1-3p靶向抑制脑源性神经营养因子(BDNF)的表达，抑制酪氨酸激酶B(TrkB)的磷酸化从而抑制人滋养细胞增殖和侵袭〔9〕。然而miR-1-3p对CRC细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及FAM225A是否通过miR-1-3p影响CRC的生物学行为还尚未清楚。本研究旨在探讨FAM225A和miR-1-3p对CRC细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及FAM225A是否通过miR-1-3p影响CRC的生物学行为。

1 材料与方法

1.1材料 正常人胚胎结肠细胞FHC和CRC细胞株SW480、HCT116购自美国菌种保藏中心(ATCC)。RPMI1640培养基购自美国Gibco公司；荧光定量试剂盒购自日本TaKaRa；四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法试剂盒、凋亡检测试剂盒购自日本同仁研究所；蛋白裂解液购自上海碧云天；兔抗人细胞周期蛋白(Cyclin)D1多克隆抗体、兔抗人裂解半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3多克隆抗体、兔抗人基质金属蛋白酶(MMP)-2多克隆抗体、兔抗人MMP-9多克隆抗体、兔抗人β-actin多克隆抗体和山羊抗兔IgG-辣根过氧化物酶(HRP)购自艾美捷科技有限公司；……