固相萃取-反相高效液相色谱法测定蛋黄中的斑蝥黄

王凤芹 刘 鑫 程远之 郭冠群 路则庆 汪以真

(浙江大学饲料科学研究所，农业农村部(华东)动物营养与饲料重点实验室，浙江省饲料与动物营养重点实验室，杭州 310058)

鸡蛋是许多国家重要的食物之一，鸡蛋除了含有蛋白质、脂肪等常规营养物质外，还含有类胡萝卜素，类胡萝卜素在蛋黄中沉积赋予其金黄色或橙色[1]。斑蝥黄化学名称为β,β-胡萝卜-4,4-二酮，主要有全反式(图1)和顺式(图2)2种异构体[2]，它作为一种重要的类胡萝卜素类红色色素，被用作禽类的着色剂，以增强禽类皮肤、肌肉以及蛋黄的颜色[3]。除此之外，就像其他类胡萝卜色素一样，它还是一种有效的抗氧化剂[4]，但是摄取过量的斑蝥黄可能在人和动物的视网膜上沉积，导致视觉问题[5]。为此，欧洲食品安全局和日本厚生劳动省规定了蛋黄中斑蝥黄的最高残留限量分别为30和25 μg/g[6]。因此，有必要建立针对蛋黄中斑蝥黄的定量检测方法，为禽蛋质量安全风险监测提供依据，继而可以为社会关切的“化妆的土鸡蛋”进行准确地质量评价，为养殖场科学、合理使用色素添加剂提供指导。

图1 全反式斑蝥黄的化学结构

图2 9-顺式斑蝥黄的化学结构

目前，对于禽蛋蛋黄中斑蝥黄残留的检测尚无相应的标准方法。文献报道的方法主要有高效液相色谱(HPLC)法[7-9]、高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS)法[2,10-11]。基于高效液相色谱法和高效液相色谱-质谱联用法分析蛋黄中斑蝥黄的仪器方法已经很成熟，但是往往忽略了对斑蝥黄顺反异构体的定量[1,12-13]，而据文献报道，斑蝥黄顺式异构体较全反式异构体具有更强的抗氧化性能[14]。……