miR-34a/ATG4B对db/db小鼠肾脏损伤中自噬和氧化应激的影响

郝建兵，唐杰，郝丽荣

(哈尔滨医科大学附属第一医院肾内科，哈尔滨 150001)

糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease，DKD)是以进行性白蛋白尿、高血压和进展性肾功能下降为特征的一组临床综合征，是糖尿病的严重并发症之一。流行病学调查显示，2017年我国糖尿病患者数量约占全世界患者数量的1/4(1.14亿/4.25亿)[1]，且30%～40%的糖尿病会逐渐发展为DKD，其中约50%进展为终末期肾病[2]，据估计，目前我国DKD患者至少3 000万～4 000万，终末期肾病患者1 500万～2 000万。DKD已逐渐成为导致慢性肾衰竭的重要原因[3]，但其确切发病机制尚不明确[4]，且缺乏有效的DKD改善方法。越来越多的研究认为，微RNA(microRNA，miRNA/miR)及自噬与DKD关系密切[5-8]，可能成为DKD治疗的新靶点。王筱霞等[9]研究发现，早期DKD小鼠血清和肾脏中miR-34a水平显著升高，并与DKD存在相关性，但具体生物学功能尚不清楚。自噬相关基因(autophagy-related gene，ATG)4B不仅是miR-34a调控的潜在靶基因，还是调控自噬的关键基因。Liu等[10]在小鼠急性肾损伤模型中证实，miR-34a能够通过ATG4B调控肾小管上皮细胞自噬水平，但miR-34a/ATG4B是否参与糖尿病肾脏损伤过程尚无报道。基于前期研究DKD和miR-34a功能的基础上，推测miR-34a/ATG4B参与在DKD的发病过程，本研究拟通过db/db小鼠(一种自发性2型糖尿病小鼠)为DKD模型探讨miR-34a/ATG4B在DKD肾脏自噬和氧化应激中作用机制。

1 材料与方法

1.1实验动物 30只SPF级4周龄雄性db/db小鼠和6只无特定病原体级4周龄雄性db/m小鼠(对照组)购自上海斯莱克实验动物有限责任公司，动物生产许可证号：SCXK(沪)2012-0002，按要求饲养(温度22～26 ℃，湿度40%～70%)，自由饮食喂养2周后开始实验研究，所有实验操作均按照哈尔滨医科大学伦理委员会关于实验动物操作标准执行。……