西藏部分地区藏猪非洲猪瘟流行病学调查与分析

王冬经，马弘财，苏中华，石 斌，甘富斌，普布次仁，曾江勇*

（1.西藏自治区农牧科学院 畜牧兽医研究所，西藏 拉萨 850000；2.西藏自治区动物疫病预防控制中心，西藏 拉萨 850000；3.林芝市农业农村局 畜牧兽医站/动物疫病预防控制中心，西藏 林芝 860000；4.昌都市左贡县畜牧站，西藏 左贡 854400）

非洲猪瘟（African swine fever，ASF）是世界动物卫生组织（OIE）必须报告的动物疫病之一，也是我国规定的一类动物疫病[1]，是由非洲猪瘟病毒（African swine fever virus，ASFV）引起的一种烈性、出血性传染病，给我国乃至全世界养猪业造成了巨大的经济损失和社会影响[2]。1900年非洲猪瘟首次在非洲东部暴发；1921年肯尼亚蒙哥马利首次报道非洲猪瘟引起家猪发病，死亡率高达100%，随后非洲南部和东部相继报道了非洲猪瘟疫情；1950年非洲猪瘟传至非洲西部，并相继在葡萄牙、西班牙、俄罗斯等欧洲国家暴发，给各国的养猪业造成了巨大损失[3]。

2018年8月，世界卫生组织报道了中国第一例非洲猪瘟疫情，发病地为辽宁省沈阳市，发病猪场死亡生猪47头，病死猪解剖见脾脏梗死、极度肿大、易碎，间质性肺炎、肺出血，淋巴结出血等病理变化[4]。此后，非洲猪瘟疫情在我国迅速传播，截至2018年12月31日，已有23个省（区）超过100起家猪感染非洲猪瘟的报道[3,4]。目前，世界各国围绕非洲猪瘟病毒灭活疫苗、弱毒疫苗、亚单位疫苗及抗病毒药物开展了大量研究，但暂未研制出高效、安全的非洲猪瘟疫苗及药物。非洲猪瘟各种综合防控措施落实较困难，对我国乃至世界养猪业仍然具有重大威胁[5]。

藏猪是我国青藏高原地区特有的家畜和优势猪种，具有抗寒、耐低氧、肉质风味独特等特点，一直深受消费者和牧民的喜爱[6]。2019年4月7日，林芝市巴宜区、波密县、工布江达县发生非洲猪瘟疫情[7]，经过防疫人员坚持不懈的努力，疫情得到了有效控制，但发病猪和死猪的全血、组织、分泌物和排泄物等均含有病毒，极易对猪群环境造成污染，严重威胁着当地养猪业的发展[8]。为了监测林芝、昌都等地非洲猪瘟感染风险，本研究共采集藏猪血清588份进行非洲猪瘟血清抗体ELISA检测，并进行分析。

1 材料与方法

1.1 血清来源

2020年，采集藏猪血清588份，其中昌都市左贡县302份，林芝市286份（巴宜区64份、察隅县40份、墨脱县43份、米林县30份、朗县79份、波密县30份）。

1.2 主要试剂

非洲猪瘟病毒（ASFV）抗体检测ELISA试剂盒，购自无锡优联生物科技有限公司，生产批号为200704。

1.3 主要仪器

恒温培养箱BOXUN，购自上海博讯实业有限公司医疗设备厂；自动酶标仪Thermo，购自上海创萌生物有限公司；超纯水机UPR-11-15NZ，购自四川优普超纯科技有限公司；微量移液器Eppendorf，购自赛伯乐（上海）仪器有限公司。

1.4 检测方法

样品检测严格按照试剂盒使用说明书进行操作。

1.5 结果判定

试验成立的条件是P-S≥0.9。若S/P≥0.25，样品判定为阳性；若S/P＜0.25，样品判定为阴性。S为样品OD630nm平均值，P为阳性对照OD630nm平均值，N为阴性对照OD630nm平均值。

1.6 数据统计与分析

按照地区、养殖模式、性别、年龄分别统计阳性率，并用SPSS软件进行卡方检验，P＜0.001为差异极显著，P＜0.05为差异显著，P＞0.05为差异不显著。

2 结果与分析

藏猪非洲猪瘟血清抗体检测结果见表1。未检测出非洲猪瘟阳性血清，抗体阳性率为0，不同地区、不同养殖模式、不同年龄的藏猪阳性率差异不显著（P＞0.05）。

表1 藏猪非洲猪瘟血清抗体检测结果

3 讨论

非洲猪瘟病毒为呈二十面体对称的DNA病毒，属非洲猪瘟病毒科（Asfarviridae）、非洲猪瘟病毒属（Asfarvirus）成员，病毒直径175～215nm，有囊膜，基因组为一条线性的双链DNA分子。主要有直接接触传播、间接接触传播和媒介蜱传播3种传播方式，主要有病毒分离、病毒抗原检测、病毒抗体检测及基因组DNA检测等检测方法，一般感染3～4 d后即可进行抗体检测，从而快速、有效地对非洲猪瘟疫情进行诊断[8]。目前还未研发出商品化、安全、有效的非洲猪瘟疫苗，血清检测中不存在疫苗抗体的干扰，因此通过血清学抗体试验检测亚急性型和慢性型病例具有重要意义[9]。

非洲猪瘟病毒基因组较大、功能复杂、活力强、抵抗力强且易变异，其疫苗研制难度较大。灭活疫苗仅具有部分保护性或不具有保护性；基因缺失减毒活疫苗被证实具有同源保护性，但仍未解决其安全问题；DNA疫苗能够诱导产生体液免疫和细胞免疫，但不能起到保护作用；亚单位疫苗具有部分保护性；病毒活载体疫苗仍需要进一步研究；新型的单周期病毒疫苗正被研究，为非洲猪瘟新型疫苗研制提供了新选择[10]。

非洲猪瘟病毒耐低温、耐盐、存活力强（在死猪尸体中可存活1年），黏附能力较强，可随生猪屠宰、运输、食用等形成流动的污染链。由于没有有效的商品化疫苗及治疗药物，切断传播途径是广大生猪养殖企业和养殖户有效防控该病的重要措施和必然手段[11]。

首先，各级政府要加大非洲猪瘟相关知识的宣传力度，呼吁全民防控、全民监督，做到疫情公开透明、责任落实到人。加强非洲猪瘟检验检疫和防控工作，成立监督小组，加大监督管理力度，做到联防联控、周密部署、精心安排。同时，加强经费保障[12]。

其次，养殖场要严格落实封闭饲养。引种、生猪销售、人员和车辆往来是感染非洲猪瘟的主要途径，养殖场（户）应采取封闭管理模式，对各环节进行严格把控，尽量减少生猪的交易次数，必要时暂停交易。禁止从疫区购进生猪，做好早期检测工作，严格引种，对养殖人员、物品、车辆等进行全面检查和消毒，进入场内的人员须穿戴防护服，严格做好场内日常消毒和养殖区域的生物安全隔离工作[12-14]。

最后，要引导农户规范化养殖。非洲猪瘟疫情暴发以来，卫生及生物安全管理松懈的小型养殖户、散养户遭遇了沉重打击。为了加快对非洲猪瘟疫情的防控和净化步伐，建议相关部门出台相应政策，积极引导养殖户进行规范化养殖，做好生物安全管理工作[15]。

4 结论

本次研究采集的588份藏猪血清未检测出非洲猪瘟阳性血清，抗体阳性率为0。说明目前西藏昌都、林芝地区非洲猪瘟病毒净化效果较好，为非洲猪瘟防控和藏猪养殖提供了参考依据。