电针头部特定区域和穴位对大脑中动脉阻塞大鼠缺血再灌注后不同时间点脑皮质长链非编码RNA差异性表达的影响※

梁 超 鲍春龄 彭彩钰 张燕珍 陈少萍 欧阳礼

(海南省海口市中医医院针灸科，海南 海口 570216)

近年来，长链非编码RNA(long non-coding RNA，lncRNA)被发现具有多种方式参与基因的调控与表达，如内源竞争吸附、染色质重塑、转录激活和转录阻遏等[1-2]，其转录机制在减轻缺血性卒中(CIS)损伤中发挥了重要作用，比如通过竞争性内源RNA起作用，lncRNA MEG3靶向调节miR-21/程序性细胞死亡因子4(PDCD4)信号通路影响神经元死亡[3]，lncRNA Malat1在血脑屏障中发挥抗凋亡和抗炎作用以减少缺血后脑血管实质性损伤[4]，lncRNA N1LR通过抑制p53磷酸化来增强对缺血后神经元保护作用[5]。近期有研究对CIS患者外周血转录组lncRNA进行统计分析，得出了其具有作为卒中标志物潜力的结论[6]，但lncRNA在CIS的作用及相关分子机制仍需进一步研究。本实验以电针为干预手段，通过高通量测序分析比较电针对脑缺血再灌注后不同时间点脑皮质lncRNA的差异表达，并采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)加以验证，以探讨lncRNA在脑缺血中的相关调控机制。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 无特定病原体(SPF级)SD雄性大鼠90只，体质量(200±20) g，由海南医学院实验动物中心提供，动物许可证号：SCXK(苏)2015-0001。饲养于海南医学院实验动物中心，室温20～25 ℃，湿度50%～60%，安静且避强光，自由食水。

1.1.2 主要试剂及仪器 水合氯醛溶液(广州市锐博生物科技有限公司)，辣根过氧化物酶(HRP)标记二抗、异硫氰酸荧光素(FITC)标记荧光二抗(广州市锐博生物科技有限公司)，抗荧光淬灭封片剂(广州市锐博生物科技有限公司)，real-time PCR系统[7900HT型，美国Applied Biosystems(AB)公司]，分光光度计……