马齿苋粗多糖除蛋白方法的筛选及优化

◎ 杨星星，杨锦颖，董庆军，徐海洋，曲晓兰,2

（1.山东第一医科大学（山东省医学科学院）药学院，山东 泰安 271016;2.山东第一医科大学（山东省医学科学院）药理学研究所，山东 泰安 271016）

马齿苋在我国是一种极为常见的野菜，南北方各地均有分布，它不仅营养丰富而且具有较高的经济价值，在食品、化工、药品、农牧业等诸多领域具有广泛的开发前景。马齿苋多糖是其主要活性成分之一，具有抗病毒、提高免疫力、抗衰老、降糖调脂等活性[1-2]。在其制备工艺中，去除蛋白为提高马齿苋粗多糖纯度和品质的重要环节[3-4]。因此，本研究以除蛋白率和多糖损失率为指标，选取4种常用的除蛋白方法Sevage法、三氯乙酸（TCA）法、酶法和盐酸法进行比较研究[5-6]，旨在得到一种马齿苋多糖除蛋白效率高、多糖损失低且绿色安全的方法，以期为马齿苋多糖产业化生产提供技术支持。

1 材料与方法

1.1 仪器与试药

KQ500-VDE超声波清洗器（昆山测试仪器有限公司）；UV-2700型分光光度计（日本Shimadzu）；RE-52AA型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）；STARTER-2100型pH计（奥豪斯仪器公司）等。

马齿苋采自山东第一医科大学药用植物园，考马斯亮蓝试剂盒（南京建成生物工程研究所），木瓜蛋白酶（Solarbio），三氯乙酸、葡萄糖、苯酚、无水乙醇、浓硫酸、氯仿、正丁醇等均为国产AR。

1.2 方法

1.2.1 马齿苋粗多糖的提取

马齿苋全草干燥粗粉50.00 g→石油醚回流脱 脂→500 mL纯净水超声提取（2次，30 min/次）→抽 滤→滤液浓缩→0.1%活性炭脱色→加4倍量95%乙醇→低温冷藏静置12 h→抽滤→滤渣分别用乙醚、丙酮、无水乙醇洗涤→所得沉淀除乙醇→55 ℃干燥→得马齿苋粗多糖。……