四君子汤含药血清通过抑制RhoA/Rac1/Cdc42通路影响卵巢癌细胞的上皮间质转化

李 凡张学林冯静茹郝 洁周 蕾

(河北北方学院附属第二医院,张家口 075100)

卵巢癌(ovarian cancer,OC)是全球第六大常见的女性妇科疾病,死亡率居妇科恶性肿瘤之首[1-2]。由于OC患者发作时具有隐匿性,因此确诊时70%处于晚期,为提高OC患者的生存率增加了挑战,因此开发新型有效药物改善OC治疗效果是当务之急[3]。四君子汤由人参、白术、茯苓和炙甘草四味中药材组成,对脾胃气虚、调节肠道蠕动和促进消化等具有良好的治疗效果[4]。此外,朱超等[5]研究发现,四君子汤能够抑制胃癌细胞株侧群细胞的增殖和侵袭能力。Ras同源基因家族成员A(Ras homolog gene family member A,RhoA)、Ras相关的C3肉毒素底物1(Ras-related C3 botulinum toxin substrate 1,Rac1)和细胞分裂周期蛋白42(cell division cycle 42,Cdc42)与细胞迁移和侵袭密切相关,已被证实阻断RhoA/Rac1/Cdc42信号途径,能够抑制风湿关节炎成纤维样滑膜细胞的迁移和侵袭行为,但四君子汤对卵巢癌迁移和侵袭的影响及其具体作用机制尚不明确[6]。本实验旨在探索四君子汤含药血清对人卵巢癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响,并初步研究其与RhoA/Rac1/Cdc42信号通路的关联,为OC的临床治疗提供参考。

1 材料和方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物

SPF级SD大鼠50只,8周龄,体重(200±20)g,均为雌性,购自上海剑钝生物科技有限公司[SCXK(沪)2019-0027],动物饲养于河北北方学院(药学系)[SYXK(冀)2019-004]。本研究经河北北方学院附属第二医院伦理委员会批准(伦审IACUC2019-0307号),实验符合3R保护原则。

1.1.2 细胞

人卵巢癌细胞SKOV3购自中国科学院细胞库,批号TCHu185;人卵巢上皮细胞购自北京北纳创联生物技术研究院,批号BNCC340096。

1.2 主要试剂与仪器

四君子汤颗粒(人参……