河蟹疾病的细菌检测及药敏试验

○刘殿如 宫子慧

我县临淮镇2个塘口的养殖户河蟹出现了死亡的现象，病蟹主要表现为活力差、吃食减少甚至不吃食、肝胰腺病变、鳃发黑。笔者通过对病蟹肝胰腺进行细菌分离、鉴定和药物敏感试验等研究，以期为河蟹养殖细菌性疾病的病原和防控提供科学数据和理论基础，有效地防止药物的滥用和误用。

1 材料与方法

1.1 试验材料

来自泗洪县临淮镇的2个发病的养殖塘口，采集的病蟹用采样箱加冰低温运送到实验室。

肠杆菌和其他非苛养革兰氏阴性杆菌鉴定试剂盒（比色法）（英文名API 20E）、氧化酶试剂购自梅里埃诊断产品（上海）有限公司，动物用药敏分析试剂板购自南京菲恩医疗科技有限公司，营养琼脂购自北京路桥。

1.2 方法

（1）病原菌的分离。用灭菌棉签蘸取河蟹肝胰腺，均匀涂于营养琼脂培养基上，置于28℃恒温培养18-24h后，观察菌落形态，并挑取可疑单个菌落划线接种在营养琼脂平板上，置于28℃恒温培养18-24h。

（2）生理生化特性。采用肠杆菌和其他非苛养革兰氏阴性杆菌鉴定试剂盒（比色法）系统测定各分离菌株生理生化特性。具体方法为用灭菌吸管挑取单菌落至0.85%NaCl中，制成0.5麦氏单位的菌悬液，并用吸管将菌悬液加到API 20 E试剂条的20个含干燥底物的微量小管中，使小管内底物溶解。CIT、VP、GEL小管，菌液需充满管部和杯部，其他管仅充满管部，ADH、LDC、ODC、H2S、URE小杯内加入矿物油以形成厌氧环境。盖上培养盒，于36±2℃孵育18-24h，同时做氧化酶反应构成第21个试验。孵育后，根据判读表判读各反应结果，参照生化谱检索手册，得到鉴定结果。……