熟地黄多糖对前列腺癌PC-3细胞增殖凋亡的作用及对VEGF/Akt信号通路的影响

夏旭 崔洪泉 胡培森 王交托

河南省中医院（河南中医药大学第二附属医院）泌尿外科（郑州450000）

前列腺癌为男性生殖系统常见恶性肿瘤之一，对男性健康的危害性在全部肿瘤中位列第二［1］。目前，关于前列腺癌的传统疗法往往对局限性和激素敏感性病变有较好疗效，但仍有小部分患者复发并转移、转化为激素抵抗型前列腺癌，这是泌尿肿瘤学最复杂的问题［2］。地黄是传统补益类中药，可经炮制、加工为熟地黄，熟地黄中多糖成分含量高，有抑瘤、增强免疫作用，已被证实在鼻咽癌等治疗中获取较为理想的效果［3-4］，但对前列腺癌细胞尤其是对雄激素非依赖性前列腺癌细胞作用的科学评价报道鲜见。据报道［5］，血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）/蛋白激酶B（protein kinase B，Akt）信号通路在多种恶性肿瘤发展中有重要作用，参与细胞增殖、侵袭、凋亡。本实验猜测VEGF/Akt 信号通路在雄激素非依赖性前列腺癌发展中发挥了作用，故基于该通路分析熟地黄多糖对前列腺癌PC-3 细胞增殖、侵袭、凋亡的影响，为熟地黄多糖在雄激素非依赖性前列腺癌治疗中的进一步开发提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 细胞人前列腺癌PC-3 细胞（上海传秋生物科技有限公司，批号：CQ80165）。

1.1.2 药物、试剂和仪器熟地黄多糖（陕西慈源生物有限公司，测定纯度在90%以上），细胞凋亡AnnexinV/PI 检测试剂盒（美国BD 公司），鼠抗人血管内皮细胞生长因子受体2（vascular endothelial growth factor receptor 2，VEGFR2）、Akt、磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3 kinase，PI3K）、p-Akt单克隆抗体（一抗）（美国Abcam 公司），辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase，HRP）标记的纯化山羊抗小鼠IgG 二抗、β-actin 抗体（北京百奥莱博科技有限公司）。……