响应面法优化紫丁香愈伤组织诱导条件及防褐化研究

郭彩珍

(吕梁学院生命科学系， 山西 吕梁 033000)

anti-browning agent

紫丁香(SyringaoblataLind.)别名丁香、华北紫丁香、百结、情客，具有较强的适应能力。紫丁香的叶和树皮均可入药；从紫丁香中提取的紫丁香苷有强烈的抗肝毒作用[1-2]。但因紫丁香是木本植物，相比较草本植物需要较长的营养生长期，这是利用传统育种方法改良其性状的主要障碍，所以木本植物的遗传转化远远落后于草本植物，而利用植物细胞离体培养技术对研究紫丁香的高频再生体系及高效遗传转化体系都有一定帮助[3]。

植物外植体在进行离体培养时，容易发生组织和细胞的褐化、玻璃化及枯死现象[4-5]，会很大程度地影响组织细胞的生长繁殖以及其愈伤组织的诱导。关于紫丁香的栽培及化学成分的研究等方面已有过报道，但是对其外植体进行诱导愈伤组织方面的研究较少[6-7]。本试验以紫丁香为材料，从最佳外植体的筛选、愈伤组织诱导条件的优化及不同抗褐化剂对紫丁香茎愈伤组织诱导情况的影响方面进行综合研究，以期为紫丁香植物资源保护和愈伤组织的进一步开发利用提供一定的科学依据。

1 材 料

紫丁香采自吕梁学院校园内。采用的试剂为6-BA、NAA、2,4-D(均为分析纯)；聚乙烯吡咯炕酮(PVP)、活性炭(AC)、柠檬酸(CA)。

2 方 法

2.1 紫丁香诱导愈伤组织的最佳外植体筛选

先将紫丁香的根、茎、叶和花用紫外灯灭菌30 min，后依次用75%酒精浸泡30 s、0.1%次氯酸钠消毒20 min、蒸馏水冲洗4～5次，将紫丁香叶、茎和花剪成0.5 cm×0.5 cm大小，根长大约为0.5 cm[5]，然后在改良的……