江苏地区鸡传染性支气管炎核酸检测及其病毒分离株鉴定和基因序列分析

武小琰，张潇，何旭晖，林建，杨倩

(南京农业大学，江苏 南京 210095)

传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus, IBV)为冠状病毒科丙型冠状病毒属的典型代表种[1]，是影响世界养鸡业的主要病原之一。该病毒引起的鸡传染性支气管炎(infectious bronchitis)是一种接触传染性、病毒性呼吸道疾病[2]。IBV主要侵害家禽呼吸系统、消化系统及泌尿生殖系统，临床上对蛋鸡的危害最为严重[3-4]。低于2周龄的鸡感染IBV后可能引起输卵管永久损伤，导致产蛋能力下降或丧失。9～18周龄的蛋鸡感染IBV会引起产蛋率显著下降(高达50%)，病程持续8周以上，常出现软壳畸形蛋，蛋清呈水样。IBV暴发后相当长的一段时间内，鸡蛋质量低且蛋壳不平整，对养殖户造成巨大损失。目前，研究的主要重点在于IBV的变异性、致病性及预防控制对策。IBV疫苗免疫保护效果并不理想，原因主要有两点：其一，IBV基因组的RNA酶缺乏严密的校正功能，所以该病毒极易发生突变[5]；其二，该病毒的基因型、血清型复杂，不同血清型之间无交叉反应或交叉反应很小，所以IBV在全球范围内存在广泛流行，影响养禽业发展[6-7]。

IBV为单股正链RNA病毒，基因组全长27.6 kb左右，至少有10个开放阅读框(ORF)，编码小膜蛋白(E)、膜蛋白(M)、核衣壳蛋白(N)和纤突蛋白(S)4种主要结构蛋白[8]。其中，S蛋白是决定IBV血清型的主要蛋白，对IBV的传染性、致病性、组织嗜性起着决定性作用，同时能诱导机体产生中和抗体和血凝抑制抗体，是IBV的保护性抗原[9]。因此，S基因的核苷酸序列是IBV分离株分型的重要依据。S蛋白的抗原位点和高变区主要集中位于S1蛋白，当S1蛋白发生基因缺失、插入、重组或突变，就会出现新的血清学和基因型[10]。……