制片方法对枣花授粉荧光显微观察效果的影响

陈 娟，王 森，邵凤侠

（中南林业科技大学 a.经济林培育与保护教育部重点实验室；b.经济林育种与栽培国家林业和草原局重点实验室；c.湖南省南方丘陵山地生态经济林产业工程技术研究中心，湖南 长沙 410004）

中秋酥脆枣Ziziphus jujubacv.Zhongqiusucui为鼠李科Rhamnaceae 枣属Ziziphus植物[1]，是湖南省选育出来的一个高档鲜食枣品种，具有果实大、甜度高的特点[2-3]。枣花为两性完全花，呈黄绿色，具萼片、花瓣、雄蕊各5 枚。雌蕊着生蜜盘中央，柱头二裂，稀三裂，短壮丰满，呈圆锥体形，花朵盛开时先端分开[4]。枣树花量大，花期长，自然情况下坐果率很低[5]。

常用的植物制片技术有石蜡制片法、压片法、冰冻切片法、半薄切片法及超薄切片法等，观察技术有荧光显微术、扫描电镜术以及透射电镜术等[6]。枣花花柱组织较硬，细胞组织较厚，用常规压片法在光学显微镜下观察枣树花粉管的生长，效果不理想，只能观察到柱头表面花粉管的萌发，看不到柱头内部的生长过程。为使组织能被压成薄层，以利在显微镜下检查花粉管，在染色前常需要对材料进行软化。水煮和NaOH 溶液浸泡是常见的植物材料软化方式[7]。热水煮可以溶解掉植物材料内部的无机盐、糖、植物碱、单宁、色素、淀粉、果胶质、多乳糖等多种成分；NaOH 和KOH 等强碱溶液除了能溶解上述成份外，还能溶解部分木质素、戊聚糖、糖醛酸等。

成熟的花粉粒具有两层细胞壁，即花粉内壁和花粉外壁。花粉内壁的化学组成为果胶质和胼胝质，结构较薄，而外壁的组成成分为纤维素、角质和孢粉素，结构较厚[8-9]。……