评估精子受孕能力的外显子标记物筛选

吴瑞珊 张梦媛 刘晓华 赵文忠

广东省计划生育科学技术研究所(广东省生殖医院)国家卫生健康委员会男性生殖与遗传重点实验室(广州 510600)

全球约10%～15%育龄夫妇不育，其中50%与男方因素有关[1]。除了感染、内分泌、免疫、遗传、先天畸形及精索静脉曲张等病因外，有50%男性不育病因不清楚，被诊断为特发性男性不育[2]。人类精子库和辅助生殖技术的发展很大程度上解决了男方不育方面的问题。辅助生殖技术要求人类精子库提供高质量的精子，但是目前入库精子质量检测仅仅依赖于形态学检查及生化检测，缺乏特异性的评估方法，无法保证入库精子的受精能力。为建立一种可靠的基于基因层面评估精子质量的方法，本项目对前期从精子库供精标本中筛选出的高、低受孕能力精子样本进行RNA转录组差异性比较研究，从差异表达恒定的外显子中筛选多个标记物，以期为精子质量评估提供可靠的指标。

1 材料与方法

1.1 标本来源

本项目中使用的精液标本均来自广东省人类精子库，严格按照第五版WHO《人类精液检查与处理实验室手册》标准选取，参与项目的男性年龄介于26～42岁之间。本项目经广东省计划生育科学技术研究所伦理委员会同意，所有受试者都签署知情同意书。按研究要求将16份供精标本分为高受孕能力组和低受孕能力组，各8例，用于筛选特异性外显子引物；另外20份高受孕能力和低受孕能力供精标本用于验证特异性引物的有效性。……