circPDSS1通过靶向miR-1298调控肝癌细胞侵袭、迁移和凋亡的分子机制

李敏 吴兴桂 朱军华

肝癌全球最常见的人类恶性肿瘤之一，是癌症相关死亡的第三大原因[1]。尽管肝切除术、消融术和化疗等肝癌治疗策略不断完善，但由于其无限增殖、高度浸润和远处转移特性，多数患者预后仍不理想[2]。因此，深入研究肝癌进展的分子机制对寻找新的策略至关重要。近年来，环状RNA(circRNA)在癌症进展中的复杂而关键的作用引起研究者的广泛关注[3-4]。circRNA异戊二烯基二磷酸合酶亚基1(circPDSS1)是一种胃癌致癌性RNA，其高表达促进胃癌细胞周期进展并抑制细胞凋亡[5]。序列分析显示，miR-1298是circPDSS1的潜在靶基因。miR-1298在多种恶性肿瘤中被广泛下调，从而促进细胞增殖，侵袭性和迁移[6-7]。然而，circPDSS1、miR-1298在肝癌中的作用、二者是否存在调控作用并不清楚。

材料与方法

一、一般资料

选取2017年1月至2018年12月于进行手术切除的41对肝癌组织和其对应的癌旁组织(正常组织)。所有组织均经医院病理科确诊。所有患者术前未接受任何放疗、化疗或免疫治疗。每位患者签署知情同意书，本研究得到医院伦理委员会的批准。

二、细胞和试剂

肝癌细胞MHCC97H购于中国科学院上海细胞库；TRIzol试剂、反转录酶、SYBRTMGreen Master Mix、miRNeasy Mini试剂盒、miScript II反转录试剂盒、miScriptSYBR○RGreen PCR试剂盒购自北京天根生化科技有限公司；DMEM培养液、胎牛血清、青链霉素双抗、膜联蛋白-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)购自北京索莱宝生物公司；小干扰RNA(si-RNA)、miRNA模拟物(miRNA mimics)、miRNA抑制物(anti-miRNA)、过表达质粒(pcDNA-RNA)、双荧光素酶报告基因载体由北京华大基因公司提供；Transwell小室和基质胶购自美国康宁公司；基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl相关X蛋白(Bax)、磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)、兔多克隆抗体、抗抗兔IgG二抗购自上海赛信通公司。……