不同五味子品质比较研究

刘永红，李教社，张 和，张军义，谢江冰

(1.西安职业技术学院 生物工程系,陕西 西安 710077； 2.杨凌森禾农业科技有限公司, 陕西 杨凌 712100； 3.陕西云岭生态农业科技有限公司,陕西 商洛 711406)

南五味子Schisandrasphenanthera和北五味子Schisandrachinensis分别是木兰科植物华中五味子和五味子的干燥成熟果实[1]。北五味子主产于我国东北和河北部分地区，北五味子在种质资源、品种选育、栽培技术和病虫害防治等领域的研究已趋于成熟[2]。南五味子主要产于我国于我国东南部和西南部，目前关于南五味子的技术研发及推广应用相对匮乏[3]。秦岭山脉野生南五味子资源不能满足市场需求，开展南五味子品质资源研究[4～6]，可以为其一步的开发提供依据。

1 材料和方法

1.1 材料

样品1、2、3、4(北五味子)于2019年7月采自陕西省柞水县丰北河镇土桥村。样品5(南五味子)于2019年7月采自陕西省柞水县丰北河镇土桥村。样品6(南五味子)于2019年8月底采自陕西省镇安县月河镇东阳村。样品7(南五味子)于2019年8月底采自陕西省宝鸡市陇县八渡镇桃园村；样品8(南五味子)于2019年8月底采自陕西省西安市蓝田县；样品9(南五味子)于2019年8月底采自陕西省西安市户县。对照样品10(北五味子)于2018年9月采自陕西省柞水县丰北河镇土桥村。

1.2 方法

1.2.1 显微鉴定[7]取五味子样品，分别研磨成粉，过20目筛，取少量细粉于载玻片上，滴2-3滴水合氯醛至粉末上，至酒精灯上加热，至水合氯醛沸腾，反复2～3次，至显微镜下观察。

1.2.2 总糖、总酸、粗蛋白、粗脂肪的测定[8]采用费林氏试剂法测定总糖的含量，酸碱滴定法测定总酸的含量；粗蛋白测定(凯氏定氮法，GB5009.5-2003标准)；粗脂肪测定(索氏抽提法，GB5009.6-2003标准)。

1.2.3 五味子甲素、五味子酯甲测定[9，10]

1.2.3.1 供试品溶液的制备。精密称定各样品粉末0.500 g，置50 mL量瓶中，用无水甲醇提取，超声处理20 min，摇匀，滤过，即得。

1.2.3.2 色谱条件。五味子甲素、五味子乙素的流动相为无水甲醇-水(75∶25，V/V) ; 五味子甲素和五味子乙素检测的波长为 224 nm。

2 结果与分析

2.1 显微结构观察

《中国药典》记载，五味子种皮表皮石细胞表面观呈多角形或长多角形。种皮内层石细胞呈多角形、类圆形或不规则形。果皮表皮细胞表面观类多角形，较小，垂周壁略呈连珠状增厚，表面有角质线纹，含淀粉粒，表皮中散有油细胞，螺纹导管[11]。

我们在此药典标准的描述基础上，详细鉴定了不同品种南、北五味子的显微结构及区别。

图1 1号样品(a 外表石细胞； b 内层石细胞； c 分泌细胞及角质层纹理；d 导管；e 胚乳细胞及脂肪油；f 种皮内层石细胞 )

图2 2号样品(a分泌细胞及角质层纹理； b 脂肪油； c 导管；d 淀粉粒；e外表石细胞；f 导管)

图3 3号样品(a 外表石细胞； b 内层石细胞； c 淀粉粒分泌细胞及角质层纹理；d 胚乳细胞及脂肪油；e 分泌细胞及角质层纹理；f 导管)

图4 4号样品(a 外表石细胞； b 内层石细胞； c 胚乳细胞及脂肪油；d导管；e 分泌细胞及角质层纹理；f 脂肪油)

图5 5号样品(a 外表石细胞； b 内层石细胞； c 胚乳细胞及脂肪油；d导管；e 结晶；f分泌细胞及角质层纹理)

图6 6号样品(a 淀粉粒； b分泌细胞及角质层纹理； c 导管；d胚乳细胞及脂肪油；e内层石细胞；f外表石细胞)

图7 7号样品(a淀粉粒；b 脂肪油； c分泌细胞及角质层纹理；d外表石细胞；e导管；f 种皮外层石细胞)

图8 8号样品(a分泌细胞及角质层纹理； b 内层石细胞； c 外表石细胞；d胚乳细胞及脂肪油；e 导管；f 淀粉粒)

图9 9号样品(a 淀粉粒； b胚乳细胞及脂肪油； c分泌细胞及角质层纹理；d导管；e外表石细胞；f 脂肪油; g 结晶; h 内层石细胞)

五味子粉末显微结构普遍含有果皮碎片的分泌细胞及角质层纹理，种皮外表皮石细胞及内层石细胞，胚乳细胞，导管，淀粉粒，脂肪油等，5号和9号五味子样品观察到了结晶。定性观察发现不同样品在石细胞形状，导管、淀粉粒数量，脂肪油含量等方面有一定差异，如表1。

表1 9个五味子样品的显微特征

2.2 成分测定

五味子含有无机盐、有机酸、维生素、木质素、三萜、多糖等化学成分[12]。五味子具有降酶保肝，敛肺生津，补肾养心，收敛固涩等功效而备受重视[13]。《中国药典》2015版中，北五味子是以其所含的五味子醇甲作为药材的质量控制指标，南五味子是以其所含的五味子酯甲作为药材的质量控制指标，而五味子甲素亦是南、北五味子重要的木脂素类成分之一。南五味子(样品6，7，8，9)与北五味子(样品10) 各项指标测定结果见表2。结果显示除总酸外，南五味子所含总糖、粗蛋白、粗脂肪、五味子甲素及五味子酯甲含量不低于北五味子。

表2 北五味子与不同南五味子样品成分比较

3 讨论

显微测定结果表明，1号北五味子内层石细胞明显，和其早熟的特性有一定的对应性。2号北五味子脂肪油多，层纹较少，淀粉粒多，推测其含有的糖分和挥发性成分较高。3号北五味子淀粉粒多，聚集存在，导管不明显，角质层纹多，明显。4号北五味子有淀粉粒，较少，导管少且不明显，和其晚熟的特性有一定关系。5号样品成熟最晚，不断成熟过程中推测其显微结构会发生变化，但其和其它4个北五味子样品的显微结构有较明显区别，外层石细胞较黑。8月底采自秦岭不同地带的6、7、8、9号南五味子显微结构定性观察有一定区别：6号南五味子采自镇安，角质层纹明显但少。7号南五味子采自宝鸡，角质层纹较多，明显。8号南五味子采自蓝田，种皮内层石细胞难以观察。9号南五味子采自周至，有别的五味子没有的不明结构，脂肪油少，导管为梯形导管，且少。有类似结晶的物质。在后续的研究中，综合显微特征、有效成分含量及其它生理指标，筛选出优质品种，为规范化栽培推广打下基础。

8月底采自秦岭不同地带的6、7、8、9号4个南五味子的总糖、总酸、粗蛋白及粗脂肪检测结果表明，样品6总糖含量最高，达15.8 g·100 g-1，样品8总糖含量最低，达11.0 g·100 g-1，4个样品的总糖含量差别不大。样品9总酸含量最高，达54.65 g·kg-1，样品8总酸含量最低，达9.89 g·kg-1，4个样品的总酸含量差别显著。样品9粗蛋白量最高，达9.94 g·100 g-1，样品6粗蛋白含量最低，达6.66 g·100 g-1，4个样品的粗蛋白含量差别不大。样品8粗脂肪含量最高，达18.3 g·100 g-1，样品9粗脂肪含量最低，达8.6 g·100 g-1，4个样品的粗脂肪含量差别较大。 样品6、7、8所含五味子甲素含量差别不大，分别为3.70 mg·g-1、4.23 mg·g-1、3.64 mg·g-1，而样品9五味子甲素含量最高，为5.23 mg·g-1。样品6、7、8的五味子酯甲含量差别不大，分别为2.02 mg·g-1、1.93 mg·g-1、2.26 mg·g-1，而样品9五味子酯甲含量最高，为4.20 mg·g-1。五味子的五味子醇甲、酯甲、甲素是五味子中木酯素的主要成分，也是评价五味子质量标准的依据[14～15]， 4个南五味子的五味子甲素和五味子酯甲含量并不低于北五味子[16]，这表明秦岭地带南五味子品质优良，开展南五味子优质品种选育，进行规范化栽培推广有一定现实意义。另外，西起宝鸡陇县东至西安蓝田的秦岭区域内，采自周至的9号南五味子综合各种成分含量最高，其显微结构也明显异于其它南五味子品种，推测和南五味子的初加工方式有关：6、7、8号南五味子都是采后阴干，而9号南五味子是采后在开水中浸煮几秒，再捞出晒干。我们推测，这种五味子初加工方法不仅使样品干燥迅速，而且可以提高某些有效成分含量。