R848 处理小鼠精子对胚胎性别比率的影响

周正娜，唐小云，周桂珍，邓雅迪，张欣如，张 慧，阿里木江·喀迪尔，王旭光*

（1.新疆农业大学动物科学学院，新疆乌鲁木齐 830000；2.阿克苏地区沙雅县草原工作站，新疆阿克苏 842200）

性别控制技术能够加速家畜繁殖育种进程，对畜牧业发展产生巨大社会经济效益。目前性别控制主要通过两种途径，一种是X/Y 精子分离，另一种是通过早期胚胎进行性别鉴定[1]。现有的性控技术各有利弊，不能广泛应用于我国实际生产。R848 作为TLR7/8 有效激动剂，介导粒细胞、巨噬细胞、白细胞和树突状细胞的转运[2]，主要具有免疫调节作用，被推荐用于治疗皮肤病、抗病毒和抗肿瘤局部药物[3]，也被开发作为一种有效的疫苗佐剂[4]。近年，日本有研究发现，将TLR7/TLR8 的配体R848 加入精子培养基中，可以改变精子因自身产生的能量差异形成有运动差异的携带X 染色体的精子（X 精子）和携带Y 染色体的精子（Y 精子），且使用处理的精子进行体外受精后获得性别比例偏斜高的雌雄后代[5]，之后作者使用该体系分离牛冻精并获得相似结果[6]。这一发现对全世界哺乳动物辅助生殖、繁殖性能、经济等具有极大益处，但国内还未建立这种新型分离技术。本研究以小鼠为动物模型，建立简捷方便、省时高效且易操作的分离体系，继而通过成熟的PCR性别鉴定体系鉴定所获早期胚胎的性别，筛选出R848处理精子分层的最佳浓度，为后续大型家畜后代性别控制技术的建立提供参考。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物 选取体重在25～28 g 性成熟的昆明白小鼠，保证每日光照时间达到14 h，且在实验动物房饲养2 周以上。……