下调Lgr5表达对结肠癌细胞上皮-间质转化及血管生成相关因子的影响

路明，陈哲

(1.吉林市中心医院胃肠外科，吉林 吉林 132001；2. 吉林市人民医院口腔科)

结肠癌(Colon cancer, CC)是世界上最普遍的恶性肿瘤之一，远处转移和复发是患者死亡的主要原因，超过50%的CC相关死亡率是由于转移扩散到肝脏造成的[1-2]。上皮-间质转化(Epithelial-mesenchymal transition, EMT)是指上皮细胞转化为间充质细胞的生物学过程，癌细胞EMT与肿瘤的进展、转移、复发和不良预后密切相关，E-钙黏蛋白(E-cadherin)，N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)是EMT的重要指标[3]。富含亮氨酸重复序列G-蛋白偶联受体5(Lgr5)是癌症干细胞(Cancer stem cells, CSCs)上一种表面标记物，是一种7次α螺旋跨膜糖蛋白激素受体，在人大脑、胃肠道、乳腺及毛囊等处都有表达，在小肠和结肠隐窝基底柱状上皮细胞和胃黏膜腺体颈部细胞中表现出特异的干细胞活性，因而，Lgr5可以作为结肠和小肠干细胞特异性分子标记物。查阅文献发现，Lgr5在多种癌组织中高表达，如卵巢癌、肝癌和结肠癌中[4-6]，同时发现Lgr5在肠黏膜组织不同病理情况下(正常黏膜组织、炎性增生性息肉、癌组织)表达水平不同，表明Lgr5同时可作为结肠癌预测的特异性指标[7]。本文旨在阐明Lgr5对结肠癌细胞侵袭、迁移的影响，并从EMT和血管生成方面研究Lgr5促进结肠癌细胞侵袭迁移的可能机制，为结肠癌细胞的治疗提供新思路。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 细胞

人正常肠上皮细胞NCM460和人结肠癌细胞(HT-29, SW620, LoVo)均购自中科院上海细胞库。

1.1.2 药品与试剂

转染试剂盒、Lip 2000试剂盒和引物购自上海吉玛基因有限责任公司；cDNA逆转录试剂盒、荧光定量PCR试剂盒均购自美国赛默飞有限公司；……