高效液相色谱法同时测定五虫化瘀通络胶囊中3 种活性成分

荣娟娟 祁 俊 韩晓珂 徐 斌 陈 娟 王 权

安徽省芜湖市中医医院制剂室，安徽芜湖 241000

五虫化瘀通络胶囊（皖药制字Z20100005）是安徽省芜湖市中医医院（以下简称“我院”）专家经验方，主要由当归、川芎、丹参、地龙、蜈蚣、全蝎、土鳖虫、水蛭等多味中药组成。具有活血化瘀、通络止痛的功效，经过老中医多年的临床验证，其疗效可靠。主要用于治疗瘀血阻滞所致的缺血性股骨头坏死，骨折后疼痛，活动不利、骨不愈合等症[1-8]。原有的高效液相色谱法含量测定标准仅以丹酚酸B 定量控制五虫化瘀通络胶囊的质量，测定指标较单一。为了更好地进行质量控制，需要制订更加合理的含量测定方法，本研究通过高效液相色谱法同时测定五虫化瘀通络胶囊中阿魏酸、丹酚酸B 和丹参酮ⅡA 3 种指标成分[9-10]，用于监控五虫化瘀通络胶囊的质量。

1 仪器与试药

1.1 仪器

高效液相色谱仪（美国Agilent 公司，型号：Agi lent 1200 型）；万分之一电子天平（Mettler 公司，型号：XP-205）；数控超声波清洗仪（昆山市超声仪器有限公司，型号：KQ-500DB）；数显鼓风干燥箱（上海博讯实业有限公司医疗设备厂，型号：GZX-9140MBE）。

1.2 试药

阿魏酸对照品（批号：110773-201614，纯度99.0%），丹酚酸B 对照品（批号：111562-201716，纯度94.1%），丹参酮ⅡA 对照品（批号：110766-201721，纯度99.5%）均购于中国食品药品检定研究院；乙腈（TEDIA Company，色谱级）；甲醇（TEDIA Company，色谱级）；磷酸（上海展云化工有限公司，色谱级）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；以乙腈（A）-0.1%磷酸（B）为流动相，进行梯度洗脱（0～8 min，22%A；9～19 min，26%A；20～34 min，80%A；35～40 min，22%A）；柱温：20℃；流速：1.0 ml/min；检测波长：0～21 min 为286 nm（检测阿魏酸和丹酚酸B），21～40 min 为270 nm（检测丹参酮ⅡA）；进样量10 μl。

2.2 溶液的制备

2.2.1 混合对照品溶液的制备 精密称取阿魏酸对照品、丹酚酸B 对照品和丹参酮ⅡA 对照品适量，加入甲醇制成浓度分别是10.56、219.06、6.52 μg/ml 的混合对照品储备液。……